[发明专利]一种治疗脑梗死的TAT-HSP27短肽

说明书

一种治疗脑梗死的TAT‑HSP27短肽，其特征在于，包括穿膜肽TAT与鼠热休克蛋白27的N末端氨基酸65‑90区域的融合肽及其肽衍生物。与应用全长的蛋白相比，应用具有相应生物学功能的短肽具有如下优势：与全长蛋白相比，短肽的免疫原性更弱，潜在的副作用也就更少；同样的给药方案，与全长的蛋白相比，短肽可在靶组织达到更高的细胞浓度；短肽容易合成和提纯，可以避免全长重组蛋白的十分困难和非常复杂的提纯过程。

技术领域

本发明属于神经用药技术领域，涉及一种治疗脑梗死的TAT-HSP27短肽，特别是提供一种改善脑梗死引起的神经功能缺损、血脑屏障通透性破坏、神经元凋亡，能降低脑梗死体积而发挥神经保护作用的TAT-HSP27短肽。

背景技术

凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1，ASK-1)是转导脑缺血后神经元线粒体依赖性死亡信号的关键分子。有文献报道，热休克蛋白HSP27的N末端直接结合ASK1的激酶活性区域，而且明显抑制ASK1活性而抑制脑缺血引起的细胞凋亡。热休克蛋白HSP27已证明在不同损伤模型中抑制细胞凋亡，其功能由磷酸化和寡聚化状态所决定的。在未磷酸化状态下，HSP27起到分子伴侣作用，但被上游激酶磷酸化后，HSP27具有了与抑制细胞死亡的功能。我们最近的研究发现，HSP27 N-末端一个由25个氨基酸组成的关键区域（AA 65-90），它能作用于ASK1激酶域的特定区域内并抑制其活性。这个更人鼓舞的新发现给我们一个重要提示，那就是在缺血性脑卒中的治疗研究中，可应用具有抑制ASK1作用的HSP27活性短肽，而不是全长的HSP27蛋白。

发明内容

本发明提供一种改善脑梗死引起的神经功能缺损、血脑屏障通透性破坏、神经元凋亡，能降低脑梗死体积而发挥神经保护作用的TAT-HSP27短肽。

为了达到上述目的，本发明是采用下述的技术方案实现的：

一种治疗脑梗死的TAT-HSP27短肽，包括穿膜肽TAT与鼠热休克蛋白27 (HSP27)蛋白的N末端氨基酸65-90区域的融合肽及其肽衍生物，所述肽及其肽衍生物包括一条肽和一条衍生肽，其中所述的一条肽具有TAT-HSP27所示氨基酸序列；所述的一条衍生肽具有TAT-HSP27-FITC所示氨基酸序列；所述衍生肽TAT-HSP27-FITC的C末端偶联绿色荧光标记FITC[异硫氰酸荧光素]；所述TAT-HSP27的肽及其肽衍生物具体如下所示(氨基酸序列单字母标识)：

TAT-HSP27：

N端- RKKRRQRRREGPAAVTLARPAFSRALNRQLSSGVS-C端（式Ⅰ）；

TAT-HSP27-FITC：

N端-RKKRRQRRREGPAAVTLARPAFSRALNRQLSSGVSK-FITC-C端（式Ⅱ）；

作为优选，TAT-HSP27肽的35个氨基酸序列C端26个氨基酸序列(EGPAAVTLARPAFSRALNRQLSSGVS)与鼠HSP27蛋白(UniProKB蛋白数据库编号：P14602)中N端AA65-AA90序列相同；所述TAT-HSP27肽的35个氨基酸序列N端9个氨基酸序列(RKKRRQRRR)是免疫缺陷病毒(HIV-1)病毒基因组的转录激活因子Tat中AA48-AA57序列相同；所述转录激活因子Tat中AA48-AA57序列为细胞膜穿膜肽,能够携带生物活性物质进入细胞内。

作为优选，所述TAT-HSP27-FITC肽的36个氨基酸序列C端35个氨基酸序列与TAT-HSP27相同；所述TAT-HSP27-FITC肽C端偶联绿色荧光标记FITC [异硫氰酸荧光素]，其特征在于激发波长为492 nm,发射波长为518 nm。

作为优选，所述融合肽及其肽衍生物为线性结构。

与现有技术相比，本发明的优点和积极效果在于：