[发明专利]一种载药细菌外膜囊泡及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种载药细菌外膜囊泡及其制备方法和应用，具体涉及一种借助脂质体制备的载药细菌外膜囊泡及其制备方法和应用，所述应用具体为在制备抗菌药物中的应用。本发明提供了一种制备含载药细菌外膜囊泡的制剂的方法，包括如下步骤：以含载药脂质体的制剂和含细菌外膜囊泡的制剂为原料，制备得到含载药细菌外膜囊泡的制剂。本发明还保护一种制备载药细菌外膜囊泡的方法，包括如下步骤：以载药脂质体和细菌外膜囊泡为原料，制备得到载药细菌外膜囊泡。本发明还保护一种抗菌药物，含有所述含载药细菌外膜囊泡的制剂或所述载药细菌外膜囊泡。本发明在药物递送领域、抗菌药物开发领域均具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种载药细菌外膜囊泡及其制备方法和应用，具体涉及一种借助脂质体制备的载药细菌外膜囊泡及其制备方法和应用，所述应用具体为在制备抗菌药物中的应用。

背景技术

进化保守的细菌外膜囊泡，是细菌向外界释放的纳米级结构功能性小泡，最早于1967年由Chatterjee等人在霍乱弧菌正常生长阶段发现，并被命名为细菌外膜囊泡(Outermembrane vesicle，OMV)。OMV的结构与脂质体类似，其直径通常在20-300nm之间，主体为磷脂双分子层，此外还包括细菌外膜和周质成分，如周质蛋白、外膜蛋白、胞浆蛋白、肽聚糖、脂多糖、DNA、RNA、与毒力有关的各种酶等。所有革兰氏阴性菌和部分革兰氏阳性菌均可产生OMV，OMV的产生并不破坏细菌细胞的完整性。OMV的释放是非常常见的现象，是细菌一种重要的分泌机制。

OMV有多种生物学功能，在细菌的生长、生存、细菌间信息交流、毒力因子传递、维持群体稳定等生理活动中扮演着多重角色，包括：(1)在细胞间传输生物分子；(2)将毒力因子等运送到异种细菌，从而竞争性杀灭异类细菌和其它微生物；(3)将毒力因子等运送到宿主细胞内，引起宿主细胞产生免疫应答；(4)对环境中的物理、化学压力做出反应；(5)为细菌细胞提供营养；(6)防御和抵抗异物。

OMV作为疫苗是近年来最主要的应用，且已受到越来越多的关注。在OMV表面表达异种抗原，使其既作为佐剂又作为疫苗的载体，极大地提高了其作为疫苗的潜能。然而，将OMV作为药物载体的研究还比较少。

人工合成的纳米材料载体(如脂质体、聚合物胶束、金属纳米粒子等)虽然被认为是高效的药物递送载体，但是这些载体并不能进行有效的细胞间相互作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种载药细菌外膜囊泡及其制备方法和应用，具体涉及一种借助脂质体制备的载药细菌外膜囊泡及其制备方法和应用，所述应用具体为在制备抗菌药物中的应用。

本发明提供了一种制备含载药细菌外膜囊泡的制剂的方法，包括如下步骤：以含载药脂质体的制剂和含细菌外膜囊泡的制剂为原料，制备得到含载药细菌外膜囊泡的制剂。

所述方法中，由含载药脂质体的制剂提供药物，由含细菌外膜囊泡的制剂提供细菌外膜囊泡；所述药物和所述细菌外膜囊泡的质量配比为2：2-4。所述药物和所述细菌外膜囊泡的质量配比具体可为2：3。所述细菌外膜囊泡的质量以蛋白质量计。所述细菌外膜囊泡的质量以膜蛋白质量计。

所述方法中，将含载药脂质体的制剂和含细菌外膜囊泡的制剂混合，然后采用过膜挤压的方法制备得到含载药细菌外膜囊泡的制剂。

所述方法中，将含载药脂质体的制剂和含细菌外膜囊泡的制剂混合，37℃孵育1h，然后用脂质体挤出器挤出，得到含载药细菌外膜囊泡的制剂。脂质体挤出器挤出的参数具体可为：挤出压力为0.3Mpa，滤膜孔径为200nm，反复挤出10次。

所述方法中，所述含载药细菌外膜囊泡的制剂可为液态。