[发明专利]一种同时检测长春西汀中阿朴长春胺酸与长春胺酸的方法

说明书

本发明提供了一种同时检测长春西汀中阿朴长春胺酸与长春胺酸的方法，该方法包括(1)取长春西汀原料或长春西汀注射液配制供试品溶液；(2)将所述供试品溶液稀释1000倍作为对照溶液；(3)将所述供试品溶液、对照溶液，用高效液相色谱法进行色谱分离，并记录色谱图，色谱条件为：检测波长为262nm～266nm；柱温为25℃～35℃；流动相A为磷酸盐缓冲液，流动相B为甲醇；洗脱的流速为0.8～1.5ml/min；(3)按加校正因子的主成分自身对照法计算供试品溶液中阿朴长春胺酸与长春胺酸的含量。能使长春胺酸与阿朴长春胺酸、长春西汀峰达到较好分离，具有较高系统适应性，检测限低，精密度高。

技术领域

本发明涉及分析化学技术领域，尤其涉及一种同时检测长春西汀中阿朴长春胺酸与长春胺酸的方法。

背景技术

药物的杂质是指药物中存在的无治疗作用或者影响药物的稳定性、疗效，甚至对人体的健康有害的物质。在药物的研究、生产、贮存和临床应用等方面，必须保持药物的纯度，降低药物的杂质，这样才能保证药物的有效性和安全性。

长春西汀是从夹竹桃科小蔓长春花提取的一种生物碱的衍生物，其有效成分为阿朴长春胺酸乙酯。长春西汀具有多种作用，能改善大脑代谢、血流量以及血液流变学性质。本品所用长春西汀原料杂质较多，主要来源于合成过程中引入的反应原料、合成中间体、反应副产物及降解杂质。而长春胺酸是长春西汀原料合成中间体，经过先消去后酯化将会产生阿朴长春胺酸。阿朴长春胺酸也是长春西汀进入体内之后的活性代谢物，其药理作用与原形药相似，但活性相对较低。长春西汀经肝脏代谢可以迅速的转化成阿朴长春胺酸，并经肾小球过滤被排泄；在体内无蓄积，对肝肾无损害。阿朴长春胺酸无明显的毒副作用，安全性较好。但为保证产品临床使用的安全性、有效性，需对长春胺酸与阿朴长春胺酸加以严格控制。目前，长春胺酸与阿朴长春胺酸含量控制方法均未收录于CP、EP、USP等国内外药典。

对比文件1：文献“C-MS/MS测定人血浆中长春西汀体内代谢物阿朴长春胺酸”(中国药学杂志，2010)介绍了采用C-MS/MS检测阿朴长春胺酸的含量，在该检测方法中，公开了采用的流动相为2mmol/L醋酸铵-甲醇(8：92)与2mmol/L醋酸铵-甲醇(13：87)，但在该条件下阿朴长春胺酸色谱峰理论板数很低，峰形对称性差；减少甲醇比例，保留时间稍有推迟，但峰形无改善。

对比文件2：文献“超高效液相色谱-质谱/质谱联用法同时测定大鼠血浆中的长春西汀和代谢物阿朴长春胺酸”(中国药学杂志,2013)，也介绍了采用C-MS/MS检测阿朴长春胺酸的含量。在该检测方法中，公开了采用的流动相为水-甲醇(13：87)，在该条件下同样存在理论塔板数低和峰形差的问题。考虑阿朴长春胺酸分子中具有可电离的羧基，在流动相中加入0.1％～0.3％的磷酸，同时调整甲醇比例分别为0.1％磷酸溶液-甲醇(13：87)、0.1％磷酸溶液-甲醇(28：72)、0.3％磷酸溶液-甲醇(28：72)、0.3％磷酸溶液-甲醇(90：10)，但阿朴长春胺酸峰理论板数无明显改善，部分条件下还受到溶剂峰的干扰。上述两种文献报道的方法均不适用同时检测长春西汀中阿朴长春胺酸与长春胺酸含量。因此，需要建立一种简便高效的方法以有效控制长春西汀中阿朴长春胺酸与长春胺酸的含量，以确保药品的安全性。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术之缺陷，提供了同时检测长春西汀中阿朴长春胺酸与长春胺酸的方法，能使长春胺酸与阿朴长春胺酸峰达到较好分离，与长春西汀及其他色谱峰之间也能达到较好的分离，且峰型对称性较高，利于有关物质的检出，具有较高系统适应性，同时在专属性、定量限、检测限、线性范围以及重复性上都表现出无可比拟的优势，具有较高的精密度。

本发明是这样实现的：

本发明的目的在于提供了一种同时检测长春西汀中阿朴长春胺酸与长春胺酸的方法，所述方法包括如下步骤：

S1、供试品溶液的配制：取长春西汀原料或长春西汀注射液配制供试品溶液；