[发明专利]敲降甘蓝型油菜及其亲本物种MYB43的表达在提高植物抗病性中的应用

说明书

本发明公开了敲降MYB43在提高甘蓝型油菜及其亲本物种抗病性中的应用。甘蓝型油菜MYB43基因家族包括4个成员基因：BnMYB43‑1、BnMYB43‑2、BnMYB43‑3和BnMYB43‑4，其亲本物种白菜、甘蓝各有2个成员基因：BrMYB43‑1、BrMYB43‑2、BoMYB43‑1和BoMYB43‑2。通过构建RNA干扰植物表达载体，转化甘蓝型油菜中双10号后，获得转基因阳性植株茎秆接种核盘菌，结果显示转基因敲降植株的病斑显著变小，抗病性大大提高；转基因植株株型略小，但单位土地面积的产量上升。本发明为MYB43在提高甘蓝型油菜及其亲本物种的抗病性及密植高产方面提供了一种新方法。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及敲降MYB43在提高甘蓝型油菜及其亲本物种抗病性中的应用。

背景技术

甘蓝型油菜(Brassica napus，简称油菜)属于十字花科芸薹属，是由同属的白菜(Brassica rapa)与甘蓝(Brassica oleracea)通过种间天然杂交和染色体组加倍而形成的异源四倍体物种。由于天然杂交及其随后的成种过程仅仅几千年时间，因此全基因组测序等研究已表明，油菜拥有两个亲本物种(白菜、甘蓝)的全套基因组之和，且与亲本物种在对应基因间的序列几乎一致或高度相似。油菜及其亲本物种白菜和甘蓝是世界性的重要油料、蔬菜、饲料和观赏植物。在世界范围内，油菜、白菜、甘蓝等芸薹属乃至整个十字花科作物的生产中，受到多种生物和非生物性逆境胁迫的危害，其中菌核病发生普遍，危害巨大，菌核病造成油菜产量损失10％-80％。

MYB转录因子超家族对于植物生长发育和适应性具有重要意义，但绝大多数MYB基因的功能未知。对于MYB43而言，目前在十字花目植物中的已有报道只涉及其少量的表达特征信息，在拟南芥中AtMYB43在发育的纤维中表达，且AtMYB43启动子能够被维管发育调控因子AtMYB46的结合。在十字花目以外的植物中，杨树PtrMYB152是拟南芥AtMYB43的同源基因，将其超量表达后茎秆木质部变厚，次生细胞壁加厚，木质素含量增加。

但迄今为止的整个植物界中，尚缺乏MYB43与株高、分枝、株型、抗倒伏性、籽粒产量、植株抗病性等性状之间的关系的研究报道，更缺乏其分子育种应用方面的报道。对于包括拟南芥、油菜、白菜、甘蓝在内的十字花科植物的MYB43基因而言，并无转基因植物功能研究的报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供敲降甘蓝型油菜及其亲本物种MYB43的表达在提高植物抗病性中的应用，目的之二在于提供敲降甘蓝型油菜及其亲本物种MYB43的表达在减小甘蓝型油菜或其亲本物种茎杆核盘菌病斑长度中的应用；本发明的目的之三在于提供敲降甘蓝型油菜及其亲本物种MYB43的表达在提高甘蓝型油菜或其亲本物种单位面积产量中的应用。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1、敲降甘蓝型油菜及其亲本物种MYB43的表达在提高植物抗病性中的应用，所述甘蓝型油菜MYB43家族的全长cDNA序列为SEQ ID NO.25、SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.27和SEQ ID NO.28所示，亲本物种白菜MYB43家族的全长cDNA序列为SEQ ID NO.29、SEQ IDNO.30所示，亲本物种甘蓝MYB43家族的全长cDNA序列为SEQ ID NO.31、SEQ ID NO.32所示。

优选的，所述甘蓝型油菜MYB43家族的全长gDNA序列为SEQ ID NO.33、SEQ IDNO.34、SEQ ID NO.35和SEQ ID NO.36所示，亲本物种白菜MYB43家族的全长gDNA序列为SEQID NO.37、SEQ ID NO.38所示，亲本物种甘蓝MYB43家族的全长gDNA序列为SEQ ID NO.39、SEQ ID NO.40所示。

优选的，敲降MYB43的方法为，针对甘蓝型油菜、白菜、甘蓝MYB43基因家族，构建RNA干扰载体，然后将获得的转化子转化甘蓝型油菜或其亲本物种，获得敲降MYB43的植株。