[发明专利]一种禽用佐剂组合物及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种禽用佐剂组合物，该佐剂组合物包含水相和油相：水相含有占该疫苗组合物总体积的0.2～1.0％w/v DEAE葡聚糖、0.1～1.0％w/v人参茎叶皂苷。本发明还提供了含有该佐剂组合物的疫苗组合物，该疫苗组合物能避免联苗中拮抗作用，显著增加抗原的免疫效果。

技术领域

本发明属于生物制品技术领域，具体涉及佐剂组合物。

背景技术

为了减少鸡的应激反应，通常采用联苗免疫，例如重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗、(H5N1 Re-11株+Re-12株，H7N9 H7-Re2株)三价疫苗、鸡新支流法四联灭活疫苗(LaSota株+M41株+SZ株+rVP2蛋白)，但这类疫苗的一个典型问题是免疫后多种抗原之间产生免疫干扰，造成联苗免疫的效果不如对应的单苗。

为解决这一问题，通常采用两种方法，其一是增加抗原的含量，但增加抗原的含量也相应地增加了生产成本，同时有些抗原，即使增加抗原含量也不能达到理想的免疫效果；另外一种方法是是加入免疫增强剂，但是现有技术的免疫增强剂有一个显著问题，使用的成份的没有经过安全性验证，这些成份可能会带来安全性问题或者药物残留，例如CN101850117使用了咪喹莫特和CpG溶液的技术方案，CN102743750胞壁酰二肽、雷西莫特的技术方案。这些免疫成份没有批准在兽用疫苗中使用，使用后可能会产生药物残留或者安全性风险。

现有禽用疫苗佐剂的第二个问题是在油佐剂中加入硬脂酸铝作为稳定剂，硬脂酸铝会造成潜在铝的残留。

因此，现有技术缺少一种不含硬脂酸铝，没有残留和安全性风险，能够增强联苗的免疫效果的禽用疫苗免疫佐剂。

发明内容

为克服现有技术存在的缺陷，本发明提供了一种禽用佐剂组合物，其中，所述佐剂组合物包含免疫增强剂和油包水佐剂，所述免疫增强剂含有占配制的疫苗组合物总体积的0.2～1.0％w/v DEAE葡聚糖、0.1～1.0％w/v人参茎叶皂苷。

本发明通过使用上述免疫增强剂，使得常规油包水佐剂对于抗原的免疫增强作用显著提高，降低了联苗中多种抗原成分之间的干扰作用。

术语“佐剂”是指当连同抗原投与时，使受试者对这一抗原的免疫反应增强的化合物。佐剂介导的免疫反应增强可通过所属技术领域中已知的任何方法评估，包括(不限于)以下一种或多种方法：(i)与对单独抗原免疫作用起反应所产生的抗体数相比，对佐剂/抗原组合免疫作用起反应所产生的抗体数增加；(ii)识别抗原或佐剂的T细胞数增加；(iii)一种或多种I型细胞因子的含量增加；和(iv)活激发之后，体内(in vivo)的保护作用。与经单独抗原激发的受试者相比，当受试者经抗原与佐剂激发时，若抗原特异性免疫反应性的任何可测量参数(例如抗体效价或T细胞产生增加至少10％，则认为免疫反应增强。在本发明的某些实施例中，若抗原特异性免疫反应性的任何可测量参数增加至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少90％、至少95％、至少100％、至少125％、至少150％、至少175％、至少200％、至少225％、至少250％、至少275％、至少300％、至少350％、至少400％、至少450％、至少500％或至少1000％，则免疫反应增强。

DEAE葡聚糖含量可以任意选自0.2％w/v、0.3％w/v、0.4％w/v、0.5％w/v、0.6％w/v、0.7％w/v、0.8％w/v、0.9％w/v、1.0％w/v。

人参茎叶皂苷含量可以任意选自0.1％w/v、0.2％w/v、0.3％w/v、0.4％w/v、0.5％w/v、0.6％w/v、0.7％w/v、0.8％w/v、0.9％w/v、1.0％w/v。