[发明专利]自交联蛋白、配体组合物、制备方法、试剂盒及系统

权利要求书

1.一种自交联蛋白，其特征在于，包括：

至少第一信号蛋白和第二信号蛋白，所述第一信号蛋白与所述第二信号蛋白通过偶联反应或点击化学反应连接，以形成所述自交联蛋白。

2.根据权利要求1所述的自交联蛋白，其特征在于，

所述第一信号蛋白含有叠氮基团或叠氮反应基团中的一种；

所述第二信号蛋白含有叠氮基团或叠氮反应基团中的另一种；

其中，所述第一信号蛋白与所述第二信号蛋白通过叠氮基团与叠氮反应基团之间的点击化学反应连接，以形成所述自交联蛋白。

3.根据权利要求2所述的自交联蛋白，其特征在于，

所述叠氮反应基团包括：可与所述叠氮基团形成三氮唑环的炔烃、或者与所述叠氮基团形成二氮杂环的环烯烃。

4.根据权利要求1所述的自交联蛋白，其特征在于，

所述偶联反应采用的方法为混合酸酐法、碳二亚胺法、戊二醛法、戊二酸酐法、重氮化法、琥珀酸酐法、羰基二咪唑法或过碘酸钠法。

5.根据权利要求4所述的自交联蛋白，其特征在于，

所述偶联反应中用到的交联剂为基于NHS-酯和亚氨酸酯反应性基团的同型双功能氨基反应性蛋白交联剂、基于马来酰亚胺和酰肼反应基团的巯基-糖类交联剂、基于马来酰亚胺或吡啶二巯基反应基团的同型双功能交联剂、适用于蛋白和其他分子的伯胺和巯基基团之间的连接的异型双功能蛋白交联剂、适用于羧基与伯胺连接的碳二亚胺交联剂、光反应性交联剂中的异型双功能交联剂、化学选择性连接交联剂或双功能交联剂。

6.根据权利要求1所述的自交联蛋白，其特征在于

所述第一信号蛋白与所述第二信号蛋白均为碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶、藻红蛋白、藻蓝蛋白、藻红蓝蛋白或别藻蓝蛋白中的至少一种。

7.一种配体组合物，其特征在于，包括：

配体；

自交联蛋白，为如权利要求1-6任一项所述的自交联蛋白；

所述配体与所述自交联蛋白通过偶联反应或点击化学反应连接，以形成所述配体组合物。

8.根据权利要求7所述的配体组合物，其特征在于，

所述配体含有叠氮基团或叠氮反应基团中的一种；

所述自交联蛋白含有叠氮基团或叠氮反应基团中的另一种；

其中，所述配体与所述自交联蛋白通过叠氮基团与叠氮反应基团之间的点击化学反应连接，以形成所述配体组合物。

9.根据权利要求8所述的配体组合物，其特征在于，

所述叠氮反应基团包括：可与所述叠氮基团形成三氮唑环的炔烃、或者与所述叠氮基团形成二氮杂环的环烯烃。

10.根据权利要求7所述的配体组合物，其特征在于，

所述偶联反应采用的方法为混合酸酐法、碳二亚胺法、戊二醛法、戊二酸酐法、重氮化法、琥珀酸酐法、羰基二咪唑法或过碘酸钠法。

11.根据权利要求7所述的配体组合物，其特征在于，

所述配体为抗体、抗原、半抗原-载体偶联物或者亲和素中的至少一种。

12.根据权利要求11所述的配体组合物，其特征在于，

所述抗体包括血管紧张素I抗体、NT-ProBNP抗体、肌钙蛋白抗体、甲胎蛋白抗体、癌胚抗原抗体、HIV抗原抗体、乙肝表面抗原抗体、甲状腺球蛋白抗体、肌钙蛋白I或T抗体或肌红蛋白抗体中的至少一种；

所述抗原包括：血管紧张素I抗原、NT-ProBNP抗原、肌钙蛋白抗原、甲胎蛋白抗原、癌胚抗原抗原、HIV抗原抗原、乙肝表面抗原抗原、甲状腺球蛋白抗原、肌钙蛋白I或T抗原或肌红蛋白抗原中的至少一种；

所述半抗原-载体偶联物包括醛固酮以及醛固酮半抗原蛋白偶联物、HA透明质酸以及透明质酸半抗原蛋白偶联物、血管紧张素I-载体偶联物、血管紧张素II-载体偶联物或HABP透明质酸结合蛋白中的至少一种。