[发明专利]一种提高北美冬青抗氧化能力的研究方法

权利要求书

1.一种提高北美冬青抗氧化能力的研究方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1.材料选择：选取生长一致的2个北美冬青品种2年生扦插苗，三月下旬将苗木全部移栽到同一规格塑料盆中，移栽后的苗木在温室大棚中缓苗2个月；

S2.褪黑素处理：在六月中旬选择健康、长势一致的2个品种北美冬青扦插苗各18株，每个品种随机分成两组，每组各9株，其中一组喷施褪黑素，另一组则喷施等量清水作为对照；

S3.干旱胁迫处理：待褪黑素处理结束之后两组同时进行相同的干旱胁迫处理，均设置3个水平，每个水平处理3株北美冬青，其土壤相对含水量分别为田间最大持水量的80-85％、50-55％和35-40％；

S4.采样保存：当土壤相对含水量达到相应的干旱胁迫条件时记为实验采样的第0天，在处理后的第0、7、30天采集新鲜叶片，放到液氮中速冻，保存于-80℃超低温冰箱中用于后续实验的指标测定；

S5.测定指标：超氧化物歧化酶、过氧化物酶活性分别采用T-SOD试剂盒、POD试剂盒进行测定，丙二醛含量采用硫代巴比妥酸法测定，每个指标测定3个重复；

S6.数据处理与分析：采用Excel进行数据处理分析，SPSS19.0软件进行方差分析和Duncan多重比较，用SigmaPlot12.5软件作图，对测定的数据进行整理并分析；

S7.抗旱性综合评价：用隶属函数法对2个北美冬青品种的抗旱性进行综合评价。用于抗旱性分析的隶属函数值[X(μ1)，X(μ2)]计算方程为：

X(μ1)＝(X-X_min)/(X_max-X_min) (1)

X(μ2)＝1-(X-X_min)/(X_max-X_min) (2)

式中，X为某一北美冬青品种某一指标的测定值，X_max和X_min分别为所有北美冬青品种该指标的最大值和最小值。

2.如权利要求1所述的一种提高北美冬青抗氧化能力的研究方法，其特征在于：所述S1中的塑料盆选取的规格为：口径16cm，深度15cm，并且每盆内定植1株，每盆装栽培土壤1.7kg，由田园土和营养基质按3:1混匀而成。

3.如权利要求1所述的一种提高北美冬青抗氧化能力的研究方法，其特征在于：所述S2中为避免强光对褪黑素的影响，外源褪黑素处理时每2天于傍晚17:30喷施一次100μmol·L^-1褪黑素，共喷3次，喷施以叶片、叶背沾湿不滴落为度。

4.如权利要求1所述的一种提高北美冬青抗氧化能力的研究方法，其特征在于：所述S3中干旱胁迫处理通过自然干旱至设定土壤相对含水量范围，每天于早上7:30和傍晚17:30采用称重法补水控水并记录。

5.如权利要求1所述的一种提高北美冬青抗氧化能力的研究方法，其特征在于：所述S5的测量指标还包括可溶性糖含量采用蒽酮比色法测定，可溶性蛋白含量采用考马斯亮蓝法测定，每个指标测定3个重复。