[发明专利]一种稳定快速生产ε-聚赖氨酸的方法

权利要求书

1.一种稳定、快速生产ε-聚赖氨酸的方法，其特征在于：步骤如下：将链霉菌孢子悬液接种于种子培养基中，进行种子培养，待pH降至4.0-6.0，得到种子液，将所述种子液接入发酵培养基中，在温度28-32℃，溶氧20-50％下发酵培养，当发酵液中葡萄糖浓度降至8-10g/L时，流加补料培养基，恒定发酵液中葡萄糖浓度在10-12g/L；待发酵液pH降至3.0-4.5，维持恒定pH 3.0-4.5；待ε-聚赖氨酸不再增加，结束发酵；所述链霉菌保藏号为：CGMCCNo.3145。

2.如权利要求1所述一种稳定、快速生产ε-聚赖氨酸的方法，其特征在于：所述种子培养中，待所述pH降至4.5-5.5，得到种子液。

3.如权利要求1所述一种稳定、快速生产ε-聚赖氨酸的方法，其特征在于：所述发酵培养中，待所述发酵液pH降至3.5-4.5，维持恒定pH 3.5-4.5。

4.如权利要求1所述一种稳定、快速生产ε-聚赖氨酸的方法，其特征在于：所述链霉菌孢子悬液的制备步骤为：取生长成熟的链霉菌孢子加入生理盐水中，经摇匀，棉纱过滤，再加生理盐水将链霉菌孢子重悬浮，按照上述方法继续过滤1-3次，得到孢子悬液，所述孢子悬液所含孢子量为10⁷-10⁸个/ml。

5.如权利要求1所述一种稳定、快速生产ε-聚赖氨酸的方法，其特征在于：所述孢子悬液接种至种子培养基的接种量为0.2％-2％；所述种子液的培养温度为：28-32℃。

6.如权利要求1所述一种稳定、快速生产ε-聚赖氨酸的方法，其特征在于：所述种子液接入发酵培养基的接种量为5％-20％；所述发酵的溶氧为20-35％。

7.如权利要求1所述一种稳定、快速生产ε-聚赖氨酸的方法，其特征在于：所述补料培养基组成为(g/L)：葡萄糖600-1000，硫酸铵30-50，pH自然，余量为水。

8.如权利要求1所述一种稳定、快速生产ε-聚赖氨酸的方法，其特征在于：具体步骤如下：

(1)取生长成熟的链霉菌孢子加入生理盐水中，经摇匀，棉纱过滤以滤掉菌丝，再加生理盐水将链霉菌孢子重悬浮，按照上述方法继续过滤1-3次，得到孢子悬液，所述孢子悬液所含孢子量为10⁷-10⁸个/ml；

(2)将所述孢子悬液按照接种量0.2％-2％接入种子培养基中，在温度28-32℃下进行种子培养，待pH降至4.5-5.5时，得到种子液；

(3)将所述种子液按照接种量5％-20％，转接至发酵培养基中进行发酵，在温度28-32℃，溶氧20-35％下发酵培养；当发酵液中残余葡萄糖浓度降至8-10g/L时，流加补料培养基，使残余葡萄糖浓度维持在10-12g/L；待发酵液pH降至3.5-4.5时，流加碱，维持恒定pH3.5-4.5；待ε-聚赖氨酸不再增加，结束发酵。

9.如权利要求8所述一种稳定、快速生产ε-聚赖氨酸的方法，其特征在于：所述步骤(3)中，发酵培养方式为摇床振荡培养、发酵罐搅拌培养或鼓泡培养中的一种，所述摇床振荡培养的转速为180-220r/min。

10.如权利要求8所述一种稳定、快速生产ε-聚赖氨酸的方法，其特征在于：所述步骤(3)中，发酵培养基组成为(g/L)：碳源50-80、有机氮源5-10、无机氮源5-10，K₂HPO₄·3H₂O0.8，KH₂PO₄ 1.36，MgSO₄·7H₂O 0.5，ZnSO₄·7H₂O 0.04，FeSO₄·7H₂O 0.04，pH 6.0-7.5，余量为水；所述碳源为葡萄糖、甘露糖、甘露醇、半乳糖、海藻糖、果糖或糖蜜中的一种或两种以上的混合；所述有机氮源为酵母粉、酵母膏、玉米浆、蛋白胨或牛肉膏中的一种或两种以上的混合，所述无机氮源硫酸铵、氯化铵、硝酸铵或尿素中的一种或两种以上的混合。