[发明专利]一种中药五谷虫活性肽及其制备方法和用途有效
申请号: | 201910708427.X | 申请日: | 2019-08-01 |
公开(公告)号: | CN112322681B | 公开(公告)日: | 2022-09-09 |
发明(设计)人: | 李继和 | 申请(专利权)人: | 大连麦琪克生物技术有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/14;C07K1/30;A61K38/01;A61K35/64;A61P17/02;A61P3/10;A23L33/18;A23L33/17 |
代理公司: | 大连至诚专利代理事务所(特殊普通合伙) 21242 | 代理人: | 涂文诗;董彬 |
地址: | 116000 辽宁省大连市高新*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 中药 五谷 活性 及其 制备 方法 用途 | ||
本发明属于医药技术领域,具体涉及一种中药五谷虫活性肽;还涉及该中药五谷虫活性肽的制备方法和用途;该中药五谷虫活性肽,可按以下方法制备得到:取干燥中药五谷虫脱脂药渣;加入5~8倍质量的浓度为1~2wt%的NaCl,室温搅拌4~5h,离心取上清液;调节pH,析出沉淀,透析,离心取沉淀冷冻干燥得中药五谷虫蛋白,配制底物浓度为7~13%的溶液,按照中药五谷虫蛋白质量的0.5~1.5wt%加入胃蛋白酶,35~40℃条件下提取,加热煮沸,冷却后过滤,冷冻干燥得产物;该方法提高了中药五谷虫的资源利用,降低原料成本,又减少了中药五谷虫活性肽的制备过程中的脱脂步骤,且中药五谷虫活性肽的得率显著提高。
技术领域
本发明属于医药技术领域;具体涉及一种中药五谷虫活性肽;还涉及该中药五谷虫活性肽的制备方法和用途。
背景技术
五谷虫为蝇科或丽蝇科昆虫,据《本草求源》、《本草便读》中记载,五谷虫性寒,经干燥研末后,外敷,能治疗臁烂、唇疔。中医认为五谷虫性味咸寒、无毒,具有清热消滞、解毒消炎、去腐生肌等功效,可治疗臁疮等感染性外科疾病。目前五谷虫在美国和欧洲允许在临床上使用,主要将活体五谷虫用于清创治疗,但其使用并不方便、患者接受程度低、医疗用活体五谷虫饲养与保存难度大,最终很难被广泛应用。近些年来,研究者对中药五谷虫活性物质基础进行研究,制备成常规药物制剂,改变活体给药方式,提高患者接受程度。有研究者发现,中药五谷虫中肽类成分抗菌与促创面愈合活性显著,但其制备过程复杂、获得难度大、获得量少,很难应用于产业化生产过程。能够寻找一种中药五谷虫活性肽的制备方法显得十分重要。
经检索发现,公开号为CN102675409A,专利名称为《可保持五谷虫分泌排泄物活性的收集液》。该专利通过刺激活体五谷虫,使其分泌活性肽等物质,并进行收集,由于五谷虫自身分泌肽类成分量很少,应用该专利的方法很难获得大量活性肽类成分,无法达到产业化要求。结合公开号为CN108392496A,专利名称为《一种中药五谷虫脂肪酸提取工艺》,该专利将五谷虫中脂肪酸类成分进行提取,最终得到五谷虫脂肪酸和脱脂药渣,其中中药五谷虫脱脂药渣没有得到很好利用,造成资源的浪费。公开号为CN10394863,专利名称为《蟾饲五谷虫抗菌肽的医药用途》,该专利中虽然涉及五谷虫抗菌肽的提取方法,但该方法需要依赖离心机,甚至需要使用高速离心机进行15000rpm的离心操作,该离心机设备投入资金大,且高速离心的方法单次处理量少,不易应用于大批量样品的处理,此外,该方法中使用正己烷萃取,正己烷有麻醉和刺激作用,对操作者而言,长期接触可致周围神经炎,且还涉及萃取剂残留问题以及后续除杂等问题。因此,需要研发一种中药五谷虫活性肽提取工艺来解决中药五谷虫生产问题非常必要。
发明内容
本发明针对现有技术的不足,提供一种中药五谷虫活性肽的制备方法和用途。所述方法直接利用中药五谷虫脱脂药渣对中药五谷虫活性肽进行提取,即提高了中药五谷虫的资源利用,降低原料成本,又减少了中药五谷虫活性肽的制备过程中的脱脂步骤。且使用该方法获得的中药五谷虫活性肽,其得率高于公开号为CN108392496A专利名称为《一种中药五谷虫脂肪酸提取工艺》中制备得到中药五谷虫肽类成分的得率。
本发明涉及的一种中药五谷虫活性肽的制备方法,主要包括以下制备步骤:
(1)盐提法:取干燥中药五谷虫脱脂药渣;加入5~8倍质量的浓度为1~2wt%的NaCl,室温搅拌4~5h,离心取上清液;本发明中使用的中药五谷虫脱脂药渣的来源是经过脱脂处理的蝇科、丽蝇科的干燥幼虫,但使用其它近缘昆虫的干燥幼虫也可以实现本发明的技术效果。
(2)重复上述过程(1),合并2次上清液;
(3)取步骤(2)所得的上清液,调节pH6~7,析出沉淀,离心,取沉淀;
(4)对沉淀进行透析,离心,取沉淀进行冷冻干燥,得中药五谷虫蛋白,得率不低于65.0%(得到蛋白与脱脂药渣的质量比);
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