[发明专利]一种核酸的分离方法和装置

说明书

本发明提供一种核酸分离的方法，所述方法至少包括以下步骤：将琼脂糖凝胶置于电泳电场中，所述琼脂糖凝胶中琼脂糖的质量分数为3％‑6％；所述琼脂糖凝胶在电泳方向上的宽度为4mm‑6mm；加入待分离的核酸样本进行琼脂糖凝胶电泳，使部分核酸被截留在琼脂糖凝胶内，部分核酸泳出琼脂糖凝胶，实现核酸的分离。本发明利用高浓度琼脂糖的机械强度高，可以支撑较薄的凝胶，琼脂糖通过温度就可以控制固液状态，使得薄凝胶容易加工。本发明可以显著提高DNA的回收率。可以实现非同时进入凝胶情况下的核酸大小分离，连续上样可以有效的避免凝胶DNA过载时出现的电泳异常，能够用于分离大于1mg的核酸样本。

技术领域

本发明涉及生物化学领域，特别是涉及一种核酸的分离方法和装置。

背景技术

核酸的电泳技术是最常用的核酸纯化和大小分离技术。最早的生物大分子电泳是在自由溶液中进行的，随后人们寻找到了各种电泳支持介质，例如滤纸、醋酸纤维素薄膜、淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺等等。目前，用于核酸电泳的主要支持介质是琼脂糖和聚丙烯酰胺。分子生物学技术中一般使用0.5％-3％的琼脂糖凝胶，可分辨80bp-4kb的DNA片段。在现有的分子生物学技术中，更高浓度的琼脂糖凝胶也是不实用的。高浓度的琼脂糖凝胶在加热溶解过程中很容易产生气泡并且溶解不均匀；倒置在凝胶容器中凝固很快，制备很不方便；随着浓度的增加，琼脂糖凝胶变得越来越不透明，对紫外等核酸示踪方法使用的激发光有较大吸收，产生很深的背景，降低了分析灵敏度。

传统的，电泳后，回收特定片段大小或范围的核酸需要通过切割凝胶的方式。但是，从切割凝胶中回收核酸却并不容易。在DNA特异性吸附材料广泛使用之前，人们通常用“电透析”的方法，将切割凝胶装到透析袋中，施加朝外的电场力，将核酸再从凝胶中泳动出来。这种方法繁琐，而且损失很大。硅基材料等核酸吸附介质出现后，在高离相剂条件下，琼脂糖的氢键被破坏而溶解，使得核酸可以被硅羟基结合而被纯化出来。这种方法除了受限于硅基材料的结合能力外，还会导致琼脂糖(同样是多糖)的污染。

因此，需要一种新的核酸分离的方法。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种核酸的分离方法和装置，用于解决核酸分离效果差，回收率低的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明第一方面提供一种核酸的分离方法，所述方法至少包括以下步骤：

(1)将琼脂糖凝胶置于电泳电场中，所述琼脂糖凝胶中琼脂糖的质量分数为3％-6％；所述琼脂糖凝胶在电泳方向上的宽度为4mm-6mm；

(2)加入待分离的核酸样本进行琼脂糖凝胶电泳，使部分核酸被截留在琼脂糖凝胶内，部分核酸泳出琼脂糖凝胶，实现核酸的分离。

本发明第二方面提供一种核酸分离的装置，所述装置包括：

第一电极和第二电极，用于形成电泳电场；

分离组件，所述分离组件设于所述电泳电场内，所述分离组件包括：

凝胶区，用于容置电泳方向上最大泳距为4mm-6mm且琼脂糖的质量分数为3％-6％的琼脂糖凝胶；

回收仓，在电泳方向上设置于凝胶区之后；

电泳槽，用于放置电泳缓冲液及所述第一电极和第二电极，所述电泳槽中设有与所述凝胶区相连的上样区，用于添加样本。

本发明第三方面提供一种前述核酸分离的方法或核酸分离的装置在核酸分离中的应用。

如上所述，本发明的一种核酸的分离方法和装置，具有以下有益效果：