[发明专利]一种生物催化合成甘油葡萄糖苷的方法有效
申请号: | 201910710353.3 | 申请日: | 2019-08-02 |
公开(公告)号: | CN110438100B | 公开(公告)日: | 2022-08-09 |
发明(设计)人: | 杨建刚;张同;曾艳;孙媛霞;马延和 | 申请(专利权)人: | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12P19/44;C12P19/18 |
代理公司: | 天津市三利专利商标代理有限公司 12107 | 代理人: | 杨欢 |
地址: | 300308 天津市*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物 催化 合成 甘油 葡萄 糖苷 方法 | ||
1.一种生物催化蔗糖和甘油合成甘油葡萄糖苷的方法,其特征是,
A、利用体外多酶反应体系包含蔗糖磷酸化酶(EC 2.4.1.7)和甘油葡萄糖苷磷酸化酶(EC 2.4.1.359),转化蔗糖和甘油合成甘油葡萄糖苷;
所述反应体系中,蔗糖磷酸化酶来源于变形链球菌
体外多酶反应体系中,缓冲液的浓度为10-100 mM,蔗糖的浓度为20 mM-2 M,甘油的浓度为20 mM-2 M,蔗糖磷酸化酶用量为0.1-1000U/mL,甘油葡萄糖苷磷酸化酶用量为0.1-1000U/mL;
所述酶催化的反应温度为10-80℃,反应pH为5.0-9.0,反应时间为1-120小时;
B、全细胞催化蔗糖和甘油合成甘油葡萄糖苷的方法,构建包含蔗糖磷酸化酶和甘油葡萄糖苷磷酸化酶的重组菌株,全细胞催化蔗糖和甘油合成甘油葡萄糖苷;
蔗糖磷酸化酶来源于变形链球菌
全细胞催化反应体系中,缓冲液的浓度为10-100 mM,蔗糖的浓度为20 mM-2 M, 甘油的浓度为20 mM-2 M,重组菌株的用量为OD600=0.2-200,所述酶催化的反应温度为10-80℃,反应pH为5.0-9.0,反应时间为1-120小时;
C、体外多酶级联合转化高浓度蔗糖和甘油合成甘油葡萄糖苷的方法,高浓度底物为0.5M-2M的蔗糖及甘油,所述多酶反应体系包含蔗糖磷酸化酶(EC 2.4.1.7)和甘油葡萄糖苷磷酸化酶(EC 2.4.1.359);
蔗糖磷酸化酶来源于变形链球菌
上述反应体系中,缓冲液的浓度为20-200 mM,蔗糖的浓度为0.5 M-3 M,甘油的浓度为0.5 M-3 M,蔗糖磷酸化酶用量为0.1-1000U/mL,甘油葡萄糖苷磷酸化酶用量为0.1-1000U/mL;
所述酶催化的反应温度为10-80℃,反应pH为5.0-9.0,反应时间为1-120小时。
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