[发明专利]用于同时检测IL-1β、IL-1Ra和IL-1Ra/IL-1β比值的胶体金试纸条

说明书

本发明提供了一种用于同时检测IL‑1β、IL‑1Ra含量和IL‑1Ra/IL‑1β比值的胶体金试纸条及其应用，涉及免疫检测技术领域；所述胶体金试纸条，包括玻璃纤维垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；所述玻璃纤维素垫上包被有胶体金标记的同时结合IL‑1β和IL‑1Ra的抗IL‑1β‑1Ra‑2兔源多克隆抗体；所述硝酸纤维素膜依次包括检测线T1、检测线T2和质控线；所述检测线T1上包被有结合IL‑1β的抗IL‑1β‑1的豚鼠源多克隆抗体；所述检测线T2上包被有结合IL‑1Ra的抗IL‑1Ra‑1的豚鼠源多克隆抗体；所述质控线上包被有羊抗兔抗体。本发明提供的胶体金试纸条具有特异、便捷、成本低、重复性好等优点。

技术领域

本发明涉及免疫检测技术领域，具体涉及一种用于同时检测IL-1β、IL-1Ra和IL-1Ra/IL-1β比值的胶体金试纸条。

背景技术

细胞因子作为炎性疾病研究热点，检测方法层出不穷。IL-1β与IL-1Ra的检测方法主要有免疫学检测法、胞内细胞因子检测法、生物活性检测法、分子生物学方法等。依靠流式细胞术的细胞因子检测方法，操作繁琐价格昂贵，不利于现场检测与基层的推广应用。生物学活性检测法灵敏度较高但是特异性差，且对温度、样品组成等外界环境要求较高。

目前市面上最常见的检测方法为免疫学方法，使用率最高的为酶联反应试剂盒，操作较为简单。但现有商品化试剂盒只能分别检测IL-1β与IL-1Ra，不能同时检测两者数量并计算比值。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种用于同时检测IL-1β、IL-1Ra含量和IL-1Ra/IL-1β比值的胶体金试纸条及其应用，本发明提供的胶体金试纸条具有特异、便捷、成本低、重复性好等优点。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种用于同时检测IL-1β、IL-1Ra含量和IL-1Ra/IL-1β比值的胶体金试纸条，包括玻璃纤维垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；所述玻璃纤维素垫上包被有胶体金标记的同时结合IL-1β和IL-1Ra的抗IL-1β-1Ra-2兔源多克隆抗体；所述硝酸纤维素膜依次包括检测线T1、检测线T2和质控线；所述检测线T1上包被有结合IL-1β的抗IL-1β-1的豚鼠源多克隆抗体；所述检测线T2上包被有结合IL-1Ra的抗IL-1Ra-1的豚鼠源多克隆抗体；所述质控线上包被有羊抗兔抗体。

优选地，所述胶体金标记的抗IL-1β-1Ra-2的兔源多克隆抗体的用量为1.0～1.4μg/100μL。

优选地，所述检测线T1上包被的抗IL-1β-1的豚鼠源多克隆抗体的浓度为1.8～2.2mg/mL。

优选地，所述检测线T2上包被的抗IL-1Ra-1的豚鼠源多克隆抗体的浓度为0.8～1.2mg/mL。

优选地，所述质控线上包被的羊抗兔抗体的浓度为0.6～1.0mg/mL。

本发明还提供了上述技术方案所述的胶体金试纸条在制备检测样品IL-1β和IL-1Ra的浓度的试剂盒中应用。

优选地，包括以下步骤：

(1)将待测样品滴加到玻璃纤维垫；

(2)待质控线显色后，观察检测线是否由无色变为红色；检测线变为红色，待测样品含有IL-1β和IL-1Ra；检测线不变色，待测样品中IL-1β和IL-1Ra含量低于检测限。

本发明还提供了上述技术方案所述的胶体金试纸条在制备检测样品IL-1Ra与IL-1β的比值的试剂盒中应用。

优选地，所述样品包括布鲁氏菌病相关血样，包括布鲁氏菌病感染动物血样、布鲁氏菌病疫苗免疫动物血样、健康未免疫布鲁氏菌病疫苗动物血样。