[发明专利]一种使用楝树叶合成荧光纳米碳点细胞成像的方法

说明书

本发明公开了一种使用楝树叶合成荧光纳米碳点细胞成像的方法，具体属于荧光纳米碳点合成和细胞成像领域。本发明的技术要点为使用楝树叶通过水热法合成荧光纳米碳点，用于细胞成像。使用合成的荧光纳米碳点在恒温培养箱中培养细胞，之后于激光共聚焦显微镜上观察细胞内荧光纳米碳点发光情况，得到细胞内部结构，拍摄细胞成像图片。成像过程中激发波长λex＝405nm，培养细胞过程中荧光纳米碳点的加入量为1mg/ml。本发明提供的方法合成路线简单易操作，原料廉价易得，不需要多次处理，合成的荧光纳米碳点量子产率较高，且生物毒性低，能够用于细胞成像分析。

技术领域

本发明属于荧光纳米碳点合成和细胞成像领域，具体涉及一种使用楝树叶合成荧光纳米碳点细胞成像的方法。

背景技术

近年来，荧光纳米材料因其优异的发光性能而受到广泛的关注。在这些材料中，金属纳米粒子和量子点由于其良好的发光性能和高量子产率而发展迅速。然而，这些材料也有一些局限性，如生物相容性和环境友好性较差。相反，碳纳米材料具有良好的稳定性、低毒性和环保性。随着碳纳米材料的发展，这些缺点逐渐被克服。特别是荧光纳米碳点的发展，使其成为纳米材料家族中一颗冉冉升起的新星。荧光纳米碳点是直径小于10nm的离散球形纳米颗粒。它们是在2004年单壁碳纳米管纯化过程中首次发现的，在化学传感、生物成像、载药和光催化等方面有着广泛的应用。

本发明首次以天然楝树叶为原料使用水热法合成荧光纳米碳点用于细胞成像。使用天然楝树叶为原料，操作简便，成本低廉，绿色环保。且合成的荧光纳米碳点毒性较低，生物相容性好，能够应用于细胞进行成像，本发明节能环保，取材方便，制备工艺简单，符合绿色化学的理念。

发明内容

本发明解决的技术问题是提供了一种绿色环保，成本低廉使用楝树叶合成荧光纳米碳点细胞成像的方法。合成荧光纳米碳点发光性能好，毒性低，生物相容性好，可以用于细胞成像。

本发明为解决上述问题采用如下技术方案为：一种使用楝树叶合成荧光纳米碳点细胞成像的方法，其具体实验步骤如下：

首先使用楝树叶通过水热法合成荧光纳米碳点，使用合成的荧光纳米碳点加入细胞培养液在恒温培养箱中培养细胞，之后于激光共聚焦显微镜上通过荧光纳米碳点发光情况观察细胞内部结构，拍摄细胞成像图片。

上述荧光纳米碳点的合成过程在于取0.5g楝树叶粉末和30mL二次水加入聚四氟乙烯反应釜中，在鼓风干燥箱中150-220℃反应10-20小时，反应结束后自然冷却，在离心机上12000转速离心20分钟，之后使用0.22μm微孔滤膜过滤得到荧光纳米碳点。

优选合成荧光纳米碳点最佳合成条件，取0.5g楝树叶粉末和30mL二次水加入聚四氟乙烯反应釜中，在鼓风干燥箱中220℃反应18小时，反应结束后自然冷却，在离心机上12000转速离心20分钟，之后使用0.22μm微孔滤膜过滤得到荧光纳米碳点。

优选的，上述荧光纳米碳点在细胞成像时最佳条件为荧光纳米碳点培养细胞时最佳加入量为1mg/mL，成像过程中激发波长为405nm。

附图说明

图1是荧光纳米碳点在A549细胞中的成像图。

图2是荧光纳米碳点的透射电子显微镜图。

图3是荧光纳米碳点的紫外吸收、荧光发射光谱和吸收光谱图。

图4是使用荧光纳米碳点培养细胞时细胞存活率和荧光纳米碳点浓度关系图。

具体实施方式

以下通过实例对本发明的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容实现的技术均属于本发明的范围。

实施例1