[发明专利]一种山苍子提取液及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种山苍子提取液在山苍子组织培养中的应用，其特征在于，所述组织培养包括以下步骤：

1）外植体的预处理：于每年4-5月初采集山苍子春稍带芽茎段，将采集的带芽茎段用洗洁精或洗衣粉洗涤后再置于流水下冲洗8-10小时，随后置于4-6℃的低温中预处理8-12小时；

2）外植体的消毒：在无菌操作台内，将低温预处理后的带芽茎段置于75%的乙醇中消毒10-15秒后，用无菌水冲洗4-5次，再置于0.1%的升汞溶液中消毒5-7分钟，随后同样用无菌水冲洗4-5次，冲洗完毕后，将无菌的带芽茎段置于无菌水中备用；

3）腋芽的萌动与生长：将消毒后的带芽茎段接种至腋芽生长培养基上进行培养，所述腋芽生长培养基为MS +1.7-2.2 mg/l 6-BA +0.5-0.7 mg/l IBA +25-30 g/l蔗糖+8-10g/l琼脂；培养温度为24-28℃，光周期为12小时光照12小时黑暗；

4）丛生芽的诱导：带芽茎段培养7-10天后，截取萌发的带2-3 mm新生幼嫩茎段的腋芽，转移至丛生芽诱导培养基上进行培养13-15天，得丛生芽；所述丛生芽诱导培养基为1/2 MS+ 1.7-2.2 mg/l 6-BA + 0.1-0.3 mg/l NAA +6-10 ml/l所述山苍子提取液+25-30 g/l蔗糖+8-10 g/l琼脂；

5）将丛生芽逐个分离后接种至生长培养基上培养1周后，即可用于后续培养；所述生长培养基为MS + 1.7-2.2 mg/l 6-BA +0.5-0.7 mg/l IBA +25-30 g/l蔗糖+8-10 g/l琼脂。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述山苍子提取液的原料包括以下组分：山苍子、水和添加剂，所述添加剂为维生素C和/或聚乙烯吡咯烷酮，所述山苍子与所述添加剂的质量比为4-8：0.5-2.5。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述山苍子提取液的制备方法包括以下步骤：

1）取上述质量份的山苍子研磨成粉，得山苍子粉末；

2）将山苍子粉末与上述质量份的添加剂和部分水混合得混合液，经保温、离心分离后，取上清液，置于容器中，以水定容至刻度，即得；

所述步骤1）中山苍子为主干基部不定芽萌发出的幼嫩徒长枝。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤1）中，山苍子在液氮中研磨成粉。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤2）中，保温的具体步骤为将混合液置于40℃水浴锅中保温3-4小时。

6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤2）中，离心转速为8000-10000 rpm/min，时间为3-5分钟。