[发明专利]柳莺属鸟类通用微卫星分子标记、引物及应用有效
| 申请号： | 201910716042.8 | 申请日： | 2019-08-02 |
| 公开（公告）号： | CN110373479B | 公开（公告）日： | 2022-05-24 |
| 发明（设计）人： | 孙成贺;鲁长虎;刘宏毅;许鹏 | 申请（专利权）人： | 南京林业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 | 代理人： | 邱兴天 |
| 地址： | 210037 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 柳莺 鸟类 通用 卫星 分子 标记 引物 应用 | ||
1.柳莺属鸟类通用微卫星分子标记，其特征在于，所述的通用微卫星分子标记为Aa-01、Ab-02、Ba-03、Bb-04、Bc-05、Da-06、Db-07、Dc-08、Ea-09、Eb-10、Ec-11、Fb-12、Fc-13、Ga-14、Gb-15、Gc-16、Ha-17、Hb-18、Ib-19、Ic-20、Ja-21、Jb-22、Ka-23、Kb-24、Kc-25、La-26或Lb-27中的一种或几种，所述的微卫星分子标记对应的核苷酸序列如下：
。
2.权利要求1所述的柳莺属鸟类通用微卫星分子标记的引物，其核苷酸序列如下：
。
3.权利要求1所述的柳莺属鸟类通用微卫星分子标记在柳莺属鸟类的遗传多样性检测、数量性状遗传图谱、遗传连锁作图、以及家系或个体鉴定方面的应用。
4.权利要求2所述的柳莺属鸟类通用微卫星分子标记的引物在柳莺属鸟类的遗传多样性检测、数量性状遗传图谱、遗传连锁作图、以及家系或个体鉴定方面的应用。
5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于，柳莺属鸟类遗传多样性检测包括以下步骤：
1)基因组DNA的提取：使用宝日医生物技术(北京)有限公司的TaKaRaMiniBESTUniversal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0(No.9765)试剂盒，提取样品总DNA；
2)微卫星PCR扩增：采用荧光标记的微卫星引物，扩增柳莺属鸟类基因组DNA，获得其扩增产物；
3)扩增产物电泳：在毛细管电泳基因分析仪上电泳，用GS500LIZ作分子量内标，个体扩增产物用GeneMarker对毛细管电泳数据初步处理；
4)遗传多样性分析：根据每个个体微卫星扩增产物的分子量大小取定基因型，利用Cervus3.0.7及PopGene32进行遗传指标测定。
6.根据权利要求3、4或5所述的应用，其特征在于，所述的柳莺属鸟类包括但不限于淡脚柳莺、冕柳莺、极北柳莺、巨嘴柳莺、日本淡脚柳莺和黄眉柳莺。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的荧光标记采用的荧光染料为FAM、TMR或HEX。
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