[发明专利]一种检测芦荟苷的方法有效

专利信息
申请号: 201910716180.6 申请日: 2019-08-05
公开(公告)号: CN110286177B 公开(公告)日: 2022-08-30
发明(设计)人: 叶炜剑;牛超;黄晓忠;孙佳;陈根 申请(专利权)人: 温州医科大学附属第二医院;温州医科大学附属育英儿童医院
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/72
代理公司: 北京高沃律师事务所 11569 代理人: 吕纪涛
地址: 325027 浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 检测 芦荟 方法
【权利要求书】:

1.一种检测芦荟苷的方法,其特征在于,包括:将检测样品与芦荟大黄素溶液混合,将得到的混合物与乙腈混合后进行离心,将得到的上清液采用液相色谱-质谱联用检测;所述检测样品包括血浆;

所述液相色谱-质谱联用检测中液相色谱的检测条件包括:

流动相:A:体积浓度0.1%甲酸水溶液,B:乙腈,梯度为:0min到0.7min,流动相B从5%上升到95%,流动相A从95%下降到5%;0.7min到1.5min,流动相B保持95%,流动相A保持5%;1.5min到1.6min,流动相B从95%下降到5%,流动相A从5%上升到95%;1.6min到2.5min,流动相B保持5%,流动相A保持95%;

流速:0.6mL/min;

柱温:20℃;

进样量:5μL;

液相色谱柱为安捷伦ZORBAX Eclipse Plus C18 Rapid Resolution HighDefinition column,规格为2.1×50mm,1.8μm;

所述液相色谱-质谱联用检测中质谱的检测条件包括:

离子源:电喷雾离子源;

毛细管电压:3500V;

干燥气温度:350℃;

干燥气流速:10L/h;

雾化气压力:45psi;

检测方式:负离子模式;

扫描方式:多重反应监测;扫描时间:50毫秒;

离子对:芦荟苷:m/z 417.1→297.0;内标芦荟大黄素:m/z 269.0→240.1;

碰撞电压:芦荟苷:170V,内标芦荟大黄素:154V;

碰撞能量:芦荟苷:14eV,内标芦荟大黄素:22eV;

所述检测样品与芦荟大黄素溶液的体积比为90~110:8~12;

所述芦荟大黄素溶液的溶剂为甲醇,所述芦荟大黄素溶液的浓度为1~3μg/mL;

所述芦荟大黄素溶液与乙腈的体积比为8~12:250~350;

所述混合物与乙腈混合的时间为2.5~3.5min;

所述离心的条件包括:所述离心的温度为3~5℃,所述离心的时间为8~12min,所述离心的离心力为12000~14000g。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,以标准品中芦荟苷的含量为横坐标,芦荟苷与内标物芦荟大黄素的响应比值为纵坐标,以1/x2为权重系数利用加权最小二乘法进行线性回归,求得标准曲线,用来计算检测样品中的芦荟苷含量;

所述标准曲线的方程式为:y=0.232877x+0.004322,线性范围是1~1000ng,相关系数r2为0.991。

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