[发明专利]一种检测芦荟苷的方法有效
申请号: | 201910716180.6 | 申请日: | 2019-08-05 |
公开(公告)号: | CN110286177B | 公开(公告)日: | 2022-08-30 |
发明(设计)人: | 叶炜剑;牛超;黄晓忠;孙佳;陈根 | 申请(专利权)人: | 温州医科大学附属第二医院;温州医科大学附属育英儿童医院 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/72 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 吕纪涛 |
地址: | 325027 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 芦荟 方法 | ||
1.一种检测芦荟苷的方法,其特征在于,包括:将检测样品与芦荟大黄素溶液混合,将得到的混合物与乙腈混合后进行离心,将得到的上清液采用液相色谱-质谱联用检测;所述检测样品包括血浆;
所述液相色谱-质谱联用检测中液相色谱的检测条件包括:
流动相:A:体积浓度0.1%甲酸水溶液,B:乙腈,梯度为:0min到0.7min,流动相B从5%上升到95%,流动相A从95%下降到5%;0.7min到1.5min,流动相B保持95%,流动相A保持5%;1.5min到1.6min,流动相B从95%下降到5%,流动相A从5%上升到95%;1.6min到2.5min,流动相B保持5%,流动相A保持95%;
流速:0.6mL/min;
柱温:20℃;
进样量:5μL;
液相色谱柱为安捷伦ZORBAX Eclipse Plus C18 Rapid Resolution HighDefinition column,规格为2.1×50mm,1.8μm;
所述液相色谱-质谱联用检测中质谱的检测条件包括:
离子源:电喷雾离子源;
毛细管电压:3500V;
干燥气温度:350℃;
干燥气流速:10L/h;
雾化气压力:45psi;
检测方式:负离子模式;
扫描方式:多重反应监测;扫描时间:50毫秒;
离子对:芦荟苷:m/z 417.1→297.0;内标芦荟大黄素:m/z 269.0→240.1;
碰撞电压:芦荟苷:170V,内标芦荟大黄素:154V;
碰撞能量:芦荟苷:14eV,内标芦荟大黄素:22eV;
所述检测样品与芦荟大黄素溶液的体积比为90~110:8~12;
所述芦荟大黄素溶液的溶剂为甲醇,所述芦荟大黄素溶液的浓度为1~3μg/mL;
所述芦荟大黄素溶液与乙腈的体积比为8~12:250~350;
所述混合物与乙腈混合的时间为2.5~3.5min;
所述离心的条件包括:所述离心的温度为3~5℃,所述离心的时间为8~12min,所述离心的离心力为12000~14000g。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,以标准品中芦荟苷的含量为横坐标,芦荟苷与内标物芦荟大黄素的响应比值为纵坐标,以1/x2为权重系数利用加权最小二乘法进行线性回归,求得标准曲线,用来计算检测样品中的芦荟苷含量;
所述标准曲线的方程式为:y=0.232877x+0.004322,线性范围是1~1000ng,相关系数r2为0.991。
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