[发明专利]一种白色链霉菌X-18及利用该菌生产ε-聚赖氨酸的方法

权利要求书

1.一种发酵生产ε-聚赖氨酸的方法，其特征在于：利用白色链球菌X-18发酵生产ε-聚赖氨酸，包括以下步骤：

步骤一、斜面固体培养

将菌种接种在固体斜面培养基上，于25～32℃培养4~7天，得到斜面固体培养的活化菌种，备用；

步骤二、摇瓶种子培养

取步骤一得到的活化菌种，加入无菌水制成菌悬液，无菌水的加入量按照一环菌种加入2～3mL；将菌悬液接种于液体种子培养基中，接种量为液体种子培养基体积的5～10%，培养温度25～32℃，摇床速度150～250 r/min，培养时间1～2 天，得到摇瓶种子液，备用；

所述的液体种子培养基的配方为：每1000mL培养基中包含蛋白胨8～14 g、酵母粉4～8g和NaCl 4～8 g，余量为水；pH为7.0～7.5；

步骤三、发酵罐培养

将经步骤二培养好的摇瓶种子液接种于装有发酵培养基的发酵罐中发酵，接种量为发酵培养基体积的5～10%，培养温度26～30℃，DO 70-90%，搅拌速度200～300 r/min，发酵液的体积与每分钟通入发酵液的空气体积比为1：2～1：5；其中，在发酵培养0-48h时向发酵液中添加无水乙醇作为诱导物，发酵培养48h后每隔24h向发酵液中添加补料液；培养时间5～7天，即可得含有ε-聚赖氨酸的发酵液；

所述的发酵培养基配方如下：每1000mL培养基，玉米淀粉10～20g，酵母粉5～10g，(NH₄)₂SO₄ 8～12g，K₂HPO₄ 0.5～1.5g，KH₂PO₄ 0.8～1.5g，MgSO₄ 0.5～1.0g，ZnSO₄ 0.03～0.05g，FeSO₄ 0.03～0.05g，pH 7.0～7.5，余量为水；

所述的补料液的组成为：每100mL补料液中含有大豆油1～3g、葡萄糖2～5g、柠檬酸二钠0.1～0.3g和硫酸铵0.3～0.5g，余量为水；所述补料液的pH 7.0～7.5；

步骤三中所述诱导物的添加量为：每100mL发酵液中添加1～3mL 无水乙醇；

步骤三中所述补料液的添加量为发酵液体积的5%；

所述白色链霉菌X-18分类命名为白色链霉菌(Streptomyces albulus)，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为中国北京市，保藏编号为CGMCCNo. 17536，保藏时间为2019年04月09日。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤一所述固体斜面培养基的配方如下：每1000mL培养基中包括葡萄糖7～15g、蛋白胨 1.0～5.0g、酵母粉1～3 g和琼脂 15～20g，余量为水；所述固体斜面培养基pH 7.2～7.8。