[发明专利]SLIT2-IT1作为分子标志物及其定量检测方法和应用

说明书

本发明提供了一种SLIT2‑IT1作为生物标记物在制备白血病辅助诊断或者预后判断试剂或药物的应用，尤其是急性髓系白血病。提供了检测SLIT2‑IT1的引物对以及检测内参ABL1的引物。

技术领域

本发明涉及肿瘤分子生物学领域，具体涉及定量检测白血病患者细胞中SLIT2-IT1作为分子标记物的方法及其用途。

背景技术

随着环境污染的加重和化学制剂的滥用，肿瘤的发病率和死亡率正呈现出逐年增高的趋势，2011年调查揭示我国的肿瘤年发病率达250个/10万人口、死亡率达186个/10万人口；而白血病的死亡率在男性和女性肿瘤患者中分别占第8位和第10位，每年分别达3.46个/10万人口和2.45个/10万人口。包含白血病在内的肿瘤是致国人死亡的第二大原因，在我国已成为威胁公众健康的一个主要问题。

急性髓细胞性白血病(AML)是起源于髓系祖细胞的一类造血系统恶性疾病，其发病涉及细胞分化、增殖、凋亡等多方面的异常改变，非随机性染色体异常、癌基因和抑癌基因突变等在AML发生发展过程中起着重要作用。近二十年的研究结果表明在白血病发生过程中表观遗传学(epigenetics)改变是继染色体异常、基因组改变如杂合性缺失以及基因突变等之外发挥重要作用的又一病理机制。表观遗传学是指在不改变DNA序列的前提下，通过某些机制引起可遗传的基因表达或细胞表型的变化，主要包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA等。近年来的研究表明，非编码RNA与AML的发生、发展密切相关，可以作为有效的分子标志物应用于AML的辅助诊断、预后判断和疾病监测，并且可以为治疗提供更多的靶向分子。临床上期待发现更多特异而敏感的非编码RNA，并将其运用于AML的临床诊疗。

SLIT2蛋白是高度保守的分泌型蛋白，主要通过与跨膜受体ROBO结合来介导其功能，且SLIT/ROBO途径可以通过调控细胞粘附、侵袭、凋亡、周期等参与肿瘤的发生发展和转移；SLIT2基因启动子CpG岛下游内含子中存在1个非编码RNA SLIT2-IT1，但SLIT2-IT1在白血病的表达状况及其意义亟待发现。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的在于针对白血病细胞中SLIT2-IT1表达，通过定量PCR技术在急性髓系白血病及正常对照中检测SLIT2-IT1的表达差异，以此作为急性髓系白血病患者的生物标志物，为临床上急性髓系白血病患者的早期发现及预后判断提供支持。

为了实现发明目的，本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明的第一个目的是提供一种SLIT2-IT1作为生物标记物在制备白血病辅助诊断或者预后判断试剂或药物的应用。

进一步地，所述SLIT2-IT1包含所述如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

进一步地，所述的白血病辅助诊断或者预后判断试剂为实时定量PCR检测试剂。

进一步地，所述实时定量PCR检测试剂包括如SEQ ID NO.2所示的正向引物和如SEQ ID NO.3所示的反向引物；以及内参ABL1引物，所述内参ABL1引物的正向引物如SEQ IDNO.4所示，反向引物如SEQ ID NO.5所示。

进一步地，所述白血病为急性髓系白血病。

本发明的第二个目的是提供检测人SLIT2-IT1表达的特异性引物，包括一条正向引物和一条反向引物，所述SLIT2-IT1序列如SEQ ID NO.1所示，所述引物序列如SEQ IDNO.2-3所示。

进一步地，所述定量PCR扩增所使用的引物还包括内参ABL1引物，其正向引物如SEQ ID NO.4所示，反向引物如SEQ ID NO.5所示。

本发明还提供一种用于白血病辅助诊断或者预后判断的试剂盒，所述试剂盒包括如前所述的引物。