[发明专利]一种参与紫草素生物合成的CYP76B100蛋白及其编码基因与应用有效
| 申请号： | 201910718772.1 | 申请日： | 2019-08-05 |
| 公开（公告）号： | CN112322592B | 公开（公告）日： | 2021-12-28 |
| 发明（设计）人： | 刘涛;宋皖;庄以彬;马延和 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N15/53;C12N1/19;C12N15/81;C12P7/22;C12R1/865 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 王正君;徐迅 |
| 地址： | 300308 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 参与 紫草 生物 合成 cyp76b100 蛋白 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种分离的CYP76B100多肽，其特征在于，所述多肽为如SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的多肽。
2.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸为编码如SEQ ID NO.1所示CYP76B100多肽的核苷酸序列。
3.如权利要求2所述的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸为如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。
4.一种载体，其特征在于，它含有权利要求2所述的多核苷酸。
5.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞含有权利要求4所述的载体，或其基因组中整合权利要求2所述的多核苷酸，所述宿主细胞选自下组：酿酒酵母、大肠杆菌、或其组合。
6.一种CYP76B100多肽的制备方法，其特征在于，所述方法包括：
(a)培养权利要求5所述的宿主细胞；
(b)从培养物中分离出所述CYP76B100多肽。
7.一种如权利要求1所述的CYP76B100多肽、权利要求4所述的载体、或权利要求5所述的宿主细胞的用途，其特征在于，它被用于催化以下反应，或被用于制备催化以下反应的催化制剂：将2-香叶基-对苯二酚的3″位碳原子进行羟基化反应，生成3″-羟基-2-香叶基-对苯二酚。
8.一种催化反应的方法，其特征在于，包括步骤：在权利要求1所述的多肽存在的条件下，进行2-香叶基-对苯二酚的3″位碳原子的羟基化的催化反应。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法在辅酶因子的存在下进行。
10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法在氧气存在下进行。
11.一种3″-羟基-2-香叶基-对苯二酚的制备方法，其特征在于，包括：
在权利要求1所述的多肽的存在下，催化2-香叶基-对苯二酚，从而得到3″-羟基-2-香叶基-对苯二酚。
12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述方法在辅酶因子的存在下进行。
13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述辅酶因子为NADPH和/或NADH。
14.如权利要求13所述的方法，其特征在于，所述辅酶因子的用量为0.5-6.0mM。
15.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述方法在氧气存在下进行。
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