[发明专利]一种茄二十八星瓢虫高致死基因及其在防治瓢虫的应用

说明书

本发明公开了一种茄二十八星瓢虫高致死基因及其在防治瓢虫的应用。本发明筛选得到一种茄二十八星瓢虫基因RPL13，以该基因作为靶标基因沉默其表达可对茄二十八星瓢虫产生高致死作用，因此开发了能够高效防治茄二十八星瓢虫的技术，即直接饲喂对茄二十八星瓢虫具有高致死能力的靶标基因dsRNA，利用靶标基因dsRNA对茄二十八星瓢虫的致死效应达到防治目的。该方法操作方便、有效性和灵敏性好、杀虫效率高，且具有环境友好等诸多优点，有很好的应用前景。

技术领域

本发明属于虫害防控技术领域。更具体地，涉及一种茄二十八星瓢虫高致死基因及其在防治瓢虫的应用。

背景技术

茄二十八星瓢虫Henosepilachnavigintioctopunctata(Fabricius)属于鞘翅目瓢虫科，主要为害茄子、马铃薯等茄科蔬菜，寄主植物十分广泛，是一种重要的农业害虫。其幼虫和成虫均以叶片为食，喜群集于叶片背面，取食下表皮、叶肉，受害叶片通常形成不规则透明斑或穿孔，严重时造成植株萎蔫甚至整株死亡。茄二十八星瓢虫在我国的分布范围广泛，尤其是长江以南发生密度较大。近年来，由于气候变暖、贸易发展以及保护地蔬菜栽培面积的扩大，其食料一年四季不断，茄二十八星瓢虫的发生和为害愈加严重。2015年，我国启动了马铃薯主粮化战略，必将进一步扩大我国马铃薯的种植面积，茄二十八星瓢虫的防治刻不容缓。

目前，茄二十八星瓢虫的防治包括人工捕捉、引诱剂诱杀、化学农药。其中人工捕捉不仅效果差，还有十分繁重的劳力问题；而引诱剂诱杀的效果也不尽如人意，不彻底；因此更多还是依赖于化学农药，但是化学农药会引起环境污染和农产品质量安全等众多问题。

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是一种在进化上保守，依赖于产生的短片段RNAs(siRNAs)，从而促进同源mRNA的降解或抑制其翻译的作用机制。RNAi提供了一个在昆虫中进行功能基因组学研究的重要工具，且为开发对环境友好的害虫治理方法奠定了基础。由于使用RNAi技术可以特异性抑制基因的表达，所以该技术已经广泛应用于靶向干扰害虫基因从而达到防治害虫的目的，但是目前国内外还没有对茄二十八星瓢虫基因功能的研究，未有杀虫活性的靶标基因报道。

本发明人团队前期研究显示(201710949193.9)，利用直接饲喂合适的外源dsRNA的方式即可实现对瓢虫的毒性，因此从基因层面开发适用于防治茄二十八星瓢虫的外源dsRNA产品，使用方便、成本低，更由于基因的特异性，可实现精确、优异的防治效果，对环境友好，在茄二十八星瓢虫的防治方面具有很大的应用前景。然而，相关靶标基因的筛选，以及防治效果好、特异、稳定的dsRNA的设计是最大的难题和关键问题。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有茄二十八星瓢虫防治技术的缺陷和不足，提供一种茄二十八星瓢虫的高致死基因，即RPL13基因。并基于该基因开发了能够高效防治茄二十八星瓢虫的技术，即直接饲喂对茄二十八星瓢虫具有高致死能力的靶标基因dsRNA，利用dsRPL13对茄二十八星瓢虫的致死效应达到防治目的。该方法操作方便、有效性和灵敏性好、杀虫效率高，且具有环境友好等诸多优点，有很好的应用前景。

本发明的目的是提供一种茄二十八星瓢虫RPL13基因及其防治茄二十八星瓢虫的应用。

本发明另一目的是提供一种可用于防治茄二十八星瓢虫的RPL13基因的dsRNA及其应用。

本发明再一目的是提供一种防治茄二十八星瓢虫的方法及试剂盒。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：