[发明专利]一种检测赭曲霉毒素A的生物传感器、其制备方法与使用该传感器检测赭曲霉毒素A的方法在审
| 申请号： | 201910719390.0 | 申请日： | 2019-08-06 |
| 公开（公告）号： | CN110261361A | 公开（公告）日： | 2019-09-20 |
| 发明（设计）人： | 杨庆利;王琦;吴薇;颜春蕾;都晗;赵海燕;于春娣;朱英莲 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京天奇智新知识产权代理有限公司 11340 | 代理人： | 贾文健 |
| 地址： | 266109 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 赭曲霉毒素A 生物传感器 传感器检测 种检测 制备 检测 荧光基团标记 核酸适配体 特异性识别 氧化石墨烯 物质检测 灵敏度 适配体 自组装 | ||
1.一种检测赭曲霉毒素A的生物传感器，其特征在于，所述生物传感器由5’端被荧光基团标记的可特异性识别赭曲霉毒素A的核酸适配体即OTA适配体，和氧化石墨烯自组装形成；
其中，
所述氧化石墨烯用作荧光猝灭剂；
所述OTA适配体的核苷酸序列为：
5’-AGCCTCGTCTGTTCTCCCGGCGCATGATCATTCGGTGGGTAAGGTGGTGGTAACGTTGGGGAAGACAAGCAGACGT-3’。
2.根据权利要求1所述检测赭曲霉毒素A的生物传感器，其特征在于，所述的荧光基团为Alexa Fluor 488、Cy5、Cy3、Alexa Fluor 594、FAM、ROX中的一种。
3.根据权利要求2所述检测赭曲霉毒素A的生物传感器，其特征在于，所述的荧光基团为Alexa Fluor 488。
4.根据权利要求1～3任一项所述检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：
将20μL浓度为1μM的OTA适配体加入到20μL的浓度为5～25μg/mL的氧化石墨烯中，摇匀后在室温下孵育10min，以使OTA适配体与氧化石墨烯充分结合，形成OTA适配体-氧化石墨烯复合物即为检测赭曲霉毒素A的生物传感器。
5.根据权利要求4所述检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法，其特征在于，所述氧化石墨烯的浓度为20μg/mL。
6.使用权利要求5制备的生物传感器检测赭曲霉毒素A的方法，其特征在于，步骤如下：
将权利要求5制备的生物传感器与待测样品按照99:1的体积比混合，于30～50℃水浴1h，以使生物传感器与待测样品充分混合，用荧光分光光度计扫描反应后的溶液在499nm激发波长下的荧光发射光谱，测定荧光强度，将测得的荧光强度导入标准曲线，计算获得待测样品中赭曲霉毒素A的浓度。
7.根据权利要求6所述检测赭曲霉毒素A的方法，其特征在于，所述水浴温度为45℃。
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