[发明专利]一种同时检测玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的生物传感器、其制备方法及其检测方法有效
申请号: | 201910719402.X | 申请日: | 2019-08-06 |
公开(公告)号: | CN110261362B | 公开(公告)日: | 2020-08-04 |
发明(设计)人: | 杨庆利;王琦;吴薇;颜春蕾;都晗;赵海燕;于春娣;朱英莲 | 申请(专利权)人: | 青岛农业大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 山东三邦知识产权代理事务所(普通合伙) 37308 | 代理人: | 肖太升;高洋 |
地址: | 266109 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 检测 玉米 赤霉烯酮 曲霉 毒素 生物 传感器 制备 方法 及其 | ||
1.一种同时检测玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的生物传感器,其特征在于,
所述生物传感器由5’ 端被荧光基团标记的可特异性识别玉米赤霉烯酮的核酸适配体即ZEN适配体,5’ 端被荧光基团标记的可特异性识别赭曲霉毒素A的核酸适配体即OTA适配体,和氧化石墨烯自组装形成;
其中,所述氧化石墨烯用作荧光猝灭剂;
所述ZEN适配体的核苷酸序列为:
5’-CTACCAGCTTTGAGGCTCGATCCAGCTTATTCAATTATACCAGCTTATTCAATTATACCAGC-3’;
所述OTA适配体的核苷酸序列为:
5’-AGCCTCGTCTGTTCTCCCGGCGCATGATCATTCGGTGGGTAAGGTGGTGGTAACGTTGGGGAAGACAAGCAGACGT-3’;
所述ZEN适配体的荧光基团标记为Cy3,所述OTA适配体的荧光基团标记为Alexa Fluor488;
所述同时检测玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,步骤如下:
将20μL浓度为1μM的ZEN适配体和20μL浓度为1μM的OTA适配体加入到20μL的浓度为20μg/mL的氧化石墨烯中,摇匀后在室温下孵育10min,以使ZEN适配体和OTA适配体与氧化石墨烯充分结合,形成ZEN适配体OTA适配体-氧化石墨烯复合物即为同时检测玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的生物传感器。
2.使用权利要求1的生物传感器同时检测玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的方法,其特征在于,步骤如下:
将权利要求1的生物传感器与待测样品按照99:1的体积比混合,于40~50℃水浴1h,以使生物传感器与待测样品充分混合,用荧光分光光度计扫描反应后的溶液分别在512nm和499nm激发波长下的荧光发射光谱,测定荧光强度,将测得的荧光强度导入标准曲线,计算获得待测样品中玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的浓度。
3.根据权利要求2所述同时检测玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的方法,其特征在于,所述水浴温度为45℃。
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