[发明专利]一种同时检测玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的生物传感器、其制备方法及其检测方法有效

专利信息
申请号: 201910719402.X 申请日: 2019-08-06
公开(公告)号: CN110261362B 公开(公告)日: 2020-08-04
发明(设计)人: 杨庆利;王琦;吴薇;颜春蕾;都晗;赵海燕;于春娣;朱英莲 申请(专利权)人: 青岛农业大学
主分类号: G01N21/64 分类号: G01N21/64
代理公司: 山东三邦知识产权代理事务所(普通合伙) 37308 代理人: 肖太升;高洋
地址: 266109 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 同时 检测 玉米 赤霉烯酮 曲霉 毒素 生物 传感器 制备 方法 及其
【权利要求书】:

1.一种同时检测玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的生物传感器,其特征在于,

所述生物传感器由5’ 端被荧光基团标记的可特异性识别玉米赤霉烯酮的核酸适配体即ZEN适配体,5’ 端被荧光基团标记的可特异性识别赭曲霉毒素A的核酸适配体即OTA适配体,和氧化石墨烯自组装形成;

其中,所述氧化石墨烯用作荧光猝灭剂;

所述ZEN适配体的核苷酸序列为:

5’-CTACCAGCTTTGAGGCTCGATCCAGCTTATTCAATTATACCAGCTTATTCAATTATACCAGC-3’;

所述OTA适配体的核苷酸序列为:

5’-AGCCTCGTCTGTTCTCCCGGCGCATGATCATTCGGTGGGTAAGGTGGTGGTAACGTTGGGGAAGACAAGCAGACGT-3’;

所述ZEN适配体的荧光基团标记为Cy3,所述OTA适配体的荧光基团标记为Alexa Fluor488;

所述同时检测玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,步骤如下:

将20μL浓度为1μM的ZEN适配体和20μL浓度为1μM的OTA适配体加入到20μL的浓度为20μg/mL的氧化石墨烯中,摇匀后在室温下孵育10min,以使ZEN适配体和OTA适配体与氧化石墨烯充分结合,形成ZEN适配体OTA适配体-氧化石墨烯复合物即为同时检测玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的生物传感器。

2.使用权利要求1的生物传感器同时检测玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的方法,其特征在于,步骤如下:

将权利要求1的生物传感器与待测样品按照99:1的体积比混合,于40~50℃水浴1h,以使生物传感器与待测样品充分混合,用荧光分光光度计扫描反应后的溶液分别在512nm和499nm激发波长下的荧光发射光谱,测定荧光强度,将测得的荧光强度导入标准曲线,计算获得待测样品中玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的浓度。

3.根据权利要求2所述同时检测玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的方法,其特征在于,所述水浴温度为45℃。

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