[发明专利]一种从丹参茎叶花提取丹酚酸B的方法

权利要求书

1.一种从丹参茎叶花提取丹酚酸B的方法，其特征是采用丹参地上部分--茎叶花为原料，在冰水浴0℃～5℃条件下制备丹参总酚酸提取物，再在冰水浴0℃～5℃条件下经过絮凝、双水相萃取、混合有机溶剂萃取后，在室温0℃～20℃柱层析精制得到丹酚酸B，具体是将丹参地上部分--茎叶花干燥粉碎后加入有机酸的弱酸性水溶液在冰水浴0℃～5℃条件下超声波提取，提取液絮凝沉淀后过滤，滤液经乙醇-磷酸二氢钾双水相萃取后乙醇相减压浓缩、真空干燥得浸膏，浸膏加水溶解后经有机酸调pH，用乙酸乙酯与正丁醇混合溶剂萃取后减压浓缩得丹酚酸B粗品，经硅胶柱层析洗脱后洗脱液减压浓缩蒸干,经乙酸乙酯重结晶后得丹酚酸B。

2.根据权利要求1所述的一种从丹参茎叶花提取丹酚酸B的方法，其特征是所述有机酸为抗坏血酸或异抗坏血酸或柠檬酸。

3.根据权利要求1所述的一种从丹参茎叶花提取丹酚酸B的方法，其特征是所述萃取用的正丁醇与乙酸乙酯混合溶剂的混合比为30:70。

4.根据权利要求1所述的一种从丹参茎叶花提取丹酚酸B的方法，其特征是所述过滤用的滤器采用孔径为20～30um的陶瓷滤器或滤布过滤。

5.根据权利要求1所述的一种从丹参茎叶花提取丹酚酸B的方法，其特征是所述硅胶柱层析为200～300目试剂级细孔柱层析硅胶，其比表面积≥600m²/g。

6.根据权利要求1所述的一种从丹参茎叶花提取丹酚酸B的方法，其特征是包括以下步骤：

①、将丹参茎叶花自然晾干后粉碎过20目筛，取100g加入pH值4.5的抗坏血酸水溶液500ml在冰水浴0℃～5℃下混合均匀，在冰水浴0℃～5℃下超声振荡15min, 在冰水浴0℃～5℃下静止4小时后用孔径为20～30um滤器过滤；过滤后固体物再加pH值4.5的抗坏血酸水溶液300ml在冰水浴0℃～5℃下混合均匀，在冰水浴0℃～5℃下超声振荡15min，静止4小时后用孔径为20～30um滤器过滤，合并两次滤液；取壳聚糖1.5g，加入0.75%抗坏血酸溶液至100ml,在50℃水浴中搅拌溶解,配制成1.5%的壳聚糖复合絮凝剂，冷至20℃备用；合并后的滤液在冰水浴0℃～5℃下加入壳聚糖复合絮凝剂60ml搅拌混合絮凝，在冰水浴0℃～5℃下静止2小时后用孔径为20～30um滤器过滤备用；

②、将①得到的滤液在冰水浴0℃～5℃下用饱和抗坏血酸水溶液调pH值至2.5，加入磷酸二氢钾90g混合均匀,再加入95%乙醇300ml, 搅拌20min后在冰水浴0℃～5℃下静止4小时后分层，取上层溶液加95%乙醇至乙醇比重为70%后磷酸二氢钾析出，用孔径为20～30um滤器过滤析出固体物，滤液45℃减压浓缩得浸膏，浸膏20℃真空干燥；

③、将②得到的浸膏加水溶解在冰水浴0℃～5℃下用饱和抗坏血酸水溶液调pH值至2.5，加水至250ml，在冰水浴0℃～5℃下用120ml正丁醇：乙酸乙酯=30:70的混合溶剂萃取两次后合并，将合并后萃取液减压蒸干，得丹酚酸B粗品，含量为90.20%；

④、在室温15℃，称取③制得的提取物粗品5g，量取50ml正丁醇：乙酸乙酯=70:30的混合溶剂溶解备用；称取200g 200～300目柱层析硅胶，用正丁醇：乙酸乙酯=70:30的混合溶剂搅拌混匀后装柱；装柱后，称量10g无水氯化钙置于硅胶柱上部；用正丁醇：乙酸乙酯=70:30的混合溶剂500ml洗脱，洗脱液回收溶剂后弃去，再用800ml无水乙醇：乙酸=99:1的混合溶剂洗脱，将洗脱液减压蒸干，溶于100ml乙酸乙酯， 在-10℃～0℃下重结晶，过滤后真空干燥得丹酚酸B，含量为98.60%。