[发明专利]辣椒细胞质雄性不育恢复性状相关的SNP标记及其特异性引物和应用有效

专利信息
申请号: 201910724935.7 申请日: 2019-08-07
公开(公告)号: CN110468225B 公开(公告)日: 2022-05-31
发明(设计)人: 张正海;王立浩;曹亚从;于海龙;张宝玺;朱砚姝 申请(专利权)人: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12N15/11
代理公司: 北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11737 代理人: 刘静荣
地址: 100081 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 辣椒 细胞质 雄性不育 恢复 性状 相关 snp 标记 及其 特异性 引物 应用
【权利要求书】:

1.一种辅助筛选辣椒细胞质雄性不育恢复系的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

使用引物对检测SNP标记S1431和SNP标记S1436,以筛选辣椒雄性不育恢复基因,所述SNP标记S1431和所述SNP标记S1436为与辣椒细胞质雄性不育恢复性状相关的SNP标记,

其中,

所述SNP标记S1431在SEQ ID No.1所示序列的第25位碱基为T或C,所述第25位碱基为所述SNP标记S1431的SNP位点;

所述SNP标记S1436在SEQ ID No.2所示序列的第25位碱基为T或G,所述第25位碱基为所述SNP标记S1436的SNP位点;

当待测辣椒在SNP标记S1431和SNP标记S1436的SNP位点处的碱基均为T:T基因型时,则待测辣椒材料为“恢复系”。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,使用KASP特异性引物组对待筛选辣椒材料进行荧光PCR扩增,所述KASP特异性组由引物对1和引物对2组成,其中,所述引物对1的序列如下:

前引物A1: 5′-GGGCATCAATAACAATGGTATAGT-3′,

前引物A2: 5′-AGGGCATCAATAACAATGGTATAGC-3′,

后引物: 5′- AGGGGTCATACTCAAAAGACTATAAGT -3′;

所述引物对2的序列如下:

前引物A1: 5′-TTGCATAGTCCATCAATCACCATGT-3′,

前引物A2: 5′-TTGCATAGTCCATCAATCACCATGT-3′,

后引物: 5′- GGACTTTCTTCTCTGAGATGGTGAA -3′,

所述前引物A1的5’端加有FAM荧光标签序列,所述前引物A2的5’端加有HEX荧光标签序列。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述FAM荧光标签序列为GAAGGTGACCAAGTTCATGCT,所述HEX荧光标签序列为GAAGGTCGGAGTCAACGGATT。

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