[发明专利]长裂苦苣菜生物碱次级分离物及其分离方法和应用有效
申请号: | 201910729482.7 | 申请日: | 2019-08-07 |
公开(公告)号: | CN110563775B | 公开(公告)日: | 2020-09-25 |
发明(设计)人: | 李秀梅;杨培龙;潘方方;石冬冬;闻治国;满晨 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院饲料研究所 |
主分类号: | C07G5/00 | 分类号: | C07G5/00;A61K36/28;A61P39/06;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/54;G01N30/36;G01N30/34;G01N30/74 |
代理公司: | 北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11737 | 代理人: | 刘静荣 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 苦苣 生物碱 次级 分离 及其 方法 应用 | ||
1.长裂苦苣菜生物碱次级分离物,其特征在于,所述次级分离物由包括以下步骤的方法制备得到:
(1)制备长裂苦苣菜提取物,所述长裂苦苣菜提取物由包括以下步骤的方法制备得到:
以75%乙醇为溶剂,将长裂苦苣菜制成液料比为30 mL/g的提取溶液,调节提取溶液的pH为5,进行超声提取,超声提取的功率为700 W,温度为55 ℃,超声时间为30 min,超声提取后,静置,取上清液,旋转蒸发后冷却干燥即得;
(2)将步骤(1)得到的长裂苦苣菜提取物配制成100 mg/mL的供试液,采用制备色谱法进行分离,色谱条件如下:
采用C18硅胶柱,以0.1%甲酸水溶液为流动相A,以甲醇为流动相B,流速10 mL/min,柱温27 - 33℃,波长为255 -265 nm,梯度洗脱程序为:
在0 - 5min的时间范围内,流动相A的体积由95%变为60%,流动相B的体积由5%变为40%;
在5-15 min的时间范围内,流动相A的体积由60%变为30%,流动相B的体积由40%变为70%;
在15-30 min的时间范围内,流动相A的体积由30%变为20%,流动相B的体积由70%变为80%;
在30-35 min的时间范围内,流动相A的体积保持为20%,流动相B的体积保持为80%;
收集峰高范围在420-2000 mAU的馏分,得到初级分离物;
(3)将步骤(2)得到的初级分离物浓缩、干燥后,配制成10 mg/mL的供试液并采用制备色谱法分离,色谱条件如下:
采用C18硅胶柱,以0.1%甲酸水溶液为流动相A,以甲醇为流动相B,流速10 mL/min,柱温27 - 33℃,波长为255 -265 nm,梯度洗脱程序为:
在0 - 5min的时间范围内,流动相A的体积由95%变为60%,流动相B的体积由5%变为40%;
在5-15 min的时间范围内,流动相A的体积由60%变为30%,流动相B的体积由40%变为70%;
在15-30 min的时间范围内,流动相A的体积由30%变为20%,流动相B的体积由70%变为80%;
在30-35 min的时间范围内,流动相A的体积保持为20%,流动相B的体积保持为80%;
收集峰高范围在0.2-1.8 AU的馏分,得到次级分离物。
2.根据权利要求1所述的长裂苦苣菜生物碱次级分离物,其特征在于,步骤(2)中,柱温为30 ℃,波长为260 nm。
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