[发明专利]间充质干细胞制剂及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种间充质干细胞制剂，包含以下组分：间充质干细胞、人血白蛋白、低分子肝素、复方氨基酸、维生素C和复方电解质；所述间充质干细胞为经过炎性细胞因子处理的间充质干细胞。所述间充质干细胞制剂适用于类风湿关节炎疾病中炎症的缓解和受损组织的修复，实现患者症状的缓解和功能的恢复。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及于治疗类风湿关节炎的间充质干细胞制剂及其制备方法。

背景技术

类风湿关节炎（RA）是一种病因未明的慢性、以炎性滑膜炎为主的系统性疾病。其特征是手、足小关节的多关节、对称性、侵袭性关节炎症，经常伴有关节外器官受累及血清类风湿因子阳性，可以导致关节畸形及功能丧失。RA女性好发，发病率为男性的2～3倍。可发生于任何年龄，高发年龄为40～60岁。RA的发病可能与遗传、感染、性激素等有关。RA关节炎的病理主要有滑膜衬里细胞增生、间质大量炎性细胞浸润，以及微血管的新生、血管翳的形成及软骨和骨组织的破坏等。类风湿关节炎治疗的主要目的在于减轻关节炎症反应，抑制病变发展及不可逆骨质破坏，尽可能保护关节和肌肉的功能，最终达到病情完全缓解或降低疾病活动度的目标。RA治疗原则包括患者教育、早期治疗、联合用药、个体化治疗方案以及功能锻炼。药物治疗主要包括非甾类抗炎药、慢作用抗风湿药、免疫抑制剂、免疫和生物制剂及植物药等。

间充质干细胞是一类具有自我更新与多向分化能力的细胞，取材容易、来源广泛。可以分化为骨、软骨、脂肪等多种组织，已经免疫调节功能，对于再生医学和自体免疫性疾病具有很大的潜力。间充质干细胞治疗骨关节炎是一种新的治疗方式，已经有大量的临床前研究证实，间充质干细胞治疗类风湿关节炎具有良好的效果。

专利CN2015104069072中提供了一种异体间质血管层细胞(SVF)和异体间充质祖细胞(haMPCs)的用途，它们被用于制备预防和/或治疗类风湿性关节炎的药物组合物。但是该方法治疗效果还有待进一步提高，并且细胞提取复杂，不利于大规模推广使用。

专利CN105833277A中公开了一种治疗类风湿性关节炎的干细胞制剂，包括间充质干细胞、人血白蛋白和NSADs。该发明通过采用间充质干细胞结合人血白蛋白和NSADs，能够在减轻患者疼痛的同时提高类风湿性关节炎的治疗效果，同样的，该方法在治疗效果上也需要大规模改进，并且其中还使用了人血白蛋白，成本较高，三种组分一起起作用，工艺复杂。

上述专利均以分离获得的间充质干细胞为主要活性成分，不对间充质干细胞做任何处理。但是，不同组织来源、不同个体来源、不同批次的间充质干细胞质量差异较大，细胞功能不确定。将分离获取的间充质干细胞直接用于类风湿炎治疗，其效果并不理想。

发明内容

本发明的目的是克服现有关节炎治疗制剂存在细胞功能不确定、不能充分发挥间充质干细胞的生物学性能等不利于关节炎的恢复的问题。为此，本发明提供了一种治疗类风湿炎的间充质干细胞制剂，该细胞制剂适用于类风湿关节炎疾病中炎症的缓解和受损组织的修复，实现患者症状的缓解和功能的恢复。

为实现本发明的目的，本发明提供以下技术方案：

本发明第一方面，提供一种间充质干细胞制剂，包含以下组分：间充质干细胞、人血白蛋白、低分子肝素、复方氨基酸、维生素C和复方电解质；所述间充质干细胞为经过炎性细胞因子处理的间充质干细胞。

优选地，所述炎性细胞因子处理所述间充质干细胞的过程为：取传代至P4代的间充质干细胞，接种于含有10% FBS和炎性细胞因子的α-MEM培养液中，于37℃，浓度为5%的CO₂培养箱中培养24-48h，即获得经过炎性细胞因子处理的间充质干细胞。

优选地，所述炎性细胞因子选自TNF-α，所述TNF-α在培养液中的终浓度为20-40ng/ml。

更优选地，所述TNF-α在培养液中的终浓度为20 ng/ml、25ng/ml、30ng/ml、35ng/ml或40ng/ml。