[发明专利]一种基因SPIB在制备肺癌分子诊断试剂盒中的应用及试剂盒和使用方法

说明书

本发明涉及一种基因SPIB在制备肺癌分子诊断试剂盒中的应用。本基因SPIB能够应用于制备肺癌分子诊断试剂盒中，该试剂盒，需要的检材更少，诊断结果更为快速准确，且本发明试剂盒的检测结果可以直接判断出患者的预后，有助于优化对肿瘤患者的个体化治疗方案，提高治疗效果。

技术领域

本发明属于生物技术和医学技术领域，尤其是一种基因SPIB在制备肺癌分子诊断试剂盒中的应用及试剂盒和使用方法。

背景技术

肺癌是世界上最常见的引起死亡的疾病之一，其发病率和死亡率近年来呈显著上升趋势。肺癌的转移是临床病人死亡的主要原因，五年存活率只有15％。肿瘤标志物(TumorMarker TM)在肿瘤普查、诊断、判断预后、评价治疗疗效和高危人群随访等方面都具有较大的实用价值，是目前肿瘤学研究的关键问题之一。尽管目前有一些肺癌标志物，如CA125、CEA、 CA153等，但是敏感性和特异性均不高，所以目前为止，临床仍然迫切需要研发更好的用于肺癌诊断的标志物和试剂盒。

SPIB(Spi-B)是ETS转录因子家族成员之一，在B细胞、pro-T细胞和浆细胞样树突状细胞(pDC)中特异性表达。在B细胞发育过程中，降低Spi-B的活性可以促进pro-B细胞向pre-B细胞的分化，但在pre-B细胞向未成熟B细胞的分化中诱导Spi-B的表达可以促进这一过程。此外，Spi-B还能促进浆细胞样树突细胞的生存和发育。该基因敲除的小鼠不仅导致了选择性的T细胞体液免疫反应的缺陷，而且影响了B细胞介导的反应。Spi-B与它的同族蛋白PU.1双基因敲除的小鼠会发生pre-B细胞急性淋巴细胞白血病，这说明SPIB基因与循环系统肿瘤的发生发展相关。Petrochilos等人采用Walktrap-GM算法，对多种肿瘤(肝癌、大肠癌和乳腺癌)表达谱的数据库进行了筛选，鉴定出SPIB基因与大肠癌的发生发展密切相关。

通过检索，尚未发现与本发明专利申请相关的专利公开文献。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种基因SPIB在制备肺癌分子诊断试剂盒中的应用及试剂盒和使用方法，该基因SPIB能够应用于制备肺癌分子诊断试剂盒中，该试剂盒，需要的检材更少，诊断结果更为快速准确，且本发明试剂盒的检测结果可以直接判断出患者的预后，有助于优化对肿瘤患者的个体化治疗方案，提高治疗效果。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种基因SPIB在制备肺癌分子诊断试剂盒中的应用。

而且，所述基因SPIB的序列为SEQ ID NO：1。

一种诊断试剂盒，所述诊断试剂盒由SPIB基因引物、内参GAPDH基因引物、DNA标准品、RNA抽提体系、RNA逆转录反应体系和Real-Time PCR反应体系六部分组成。

而且，所述SPIB基因引物为任何一对特异性扩增目标基因SPIB内50bp～300bpDNA片段的引物；

或者，所述内参GAPDH基因引物为任何一对特异性扩增内参基因GAPDH内50bp～300bp DNA片段的引物，内参基因GAPDH序列为SEQ ID NO：2；

或者，在使用时，所述SPIB基因引物的浓度为10μmol/L，所述内参GAPDH基因引物的浓度为10μmol/L。

而且，所述SPIB基因引物的序列为SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4；

或者，所述内参GAPDH基因引物的序列为SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6。

而且，所述DNA标准品为由五个不同浓度梯度的pUC19-GAPDH质粒和pUC19-SPIB质粒组成，五个浓度梯度均分别为10pg/ml、100pg/ml、1ng/ml、10ng/ml和100ng/ml，所述浓度为折合基因GAPDH分子和基因SPIB分子计的浓度。