[发明专利]与预测肝移植术后排斥反应相关的标志物EGR-1及其应用

说明书

本发明涉及医学分子生物学领域，具体地涉及预测肝移植术后排斥反应的标志物EGR‑1及其应用。利用本发明的标志物能够预警肝移植术后急性排斥反应的发生，对临床早期诊断和治疗急性排斥反应具有较好的指导意义。

技术领域

本发明涉及医学分子生物学领域，具体地涉及与预测肝移植术后排斥反应的标志物EGR-1及其应用。

背景技术

据世界卫生组织统计全球每年因肝硬化和肝癌死亡人数约为134万人。我国乙型肝炎病毒携带者多，故肝癌发生率也远较欧美国家高。自1963由Starzl教授等人开展了世界首例人类原位肝移植手术以来，随着移植相关理论的更新、交叉配型技术的完善、器官保存方法的改进及手术操作技能的整体提高，肝移植已成为目前治疗肝硬化、肝癌等终末期肝病的首选治疗方法。但由于供肝紧缺及移植后排斥反应问题严重限制其广泛开展。

移植后排斥反应主要分为超急排斥反应、急性排斥反应和慢性排斥反应。其中急性排斥反应是肝移植免疫排斥最常见类型，是肝移植术后最主要的并发症，同时也是导致慢性排斥和供肝功能丧失最重要的危险因素。缺血再灌注损伤是肝移植手术不可避免的问题，由其引发的多因素、非抗原所致的固有免疫应答是引起移植肝早期原发性无功能及肝移植后移植排斥的主要原因。虽然已有大量新型的免疫抑制药物应用于临床，但由于其靶向性差、用药时间长、副作用大及部分移植患者亚临床症状比较隐匿导致治疗不及时，因此并未取得非常令人满意的治疗效果。供肝功能一旦丧失，受者势必面临再次肝移植治疗。这不但加剧供肝紧缺的现状而且更使受者身心遭受巨大伤害及增加经济负担。因此尽可能减轻缺血再灌注损伤及有效预防、治疗急性排斥反应甚至诱导免疫耐受将长期是肝移植及其它器官移植界的重点研究方向。

发明内容

为了解决上述技术问题，发明人意外地发现组织或血清中EGR-1转录水平和/或EGR-1蛋白水平能够作为预测肝移植术后排斥反应的标志物，从而完成本发明。

本发明一方面提供EGR-1基因转录产物的检测试剂和/或EGR-1蛋白的检测试剂在制备用于预测对象肝移植术后排斥反应的试剂盒中的应用。

早期生长反应因子-1(Early Growth Response-1，EGR-1)又称NGFI-A、Zif268、Krox24、TIS8等，是一个典型的Cys2.His2型锌指转录因子，可特异性的识别并结合下游靶基因启动子区富含GC区域并在多种刺激物(如生长因子、促炎细胞因子、脂多糖、缺氧、缺血或再灌注损伤、紫外线等)的刺激下快速而短暂的激活。

在本发明的一些实施方案中，所述EGR-1基因转录产物的检测试剂包括能够特异性EGR-1基因转录产物的引物组合。

在本发明的一些具体实施方案中，所述转录产物包括由EGR-1mRNA逆转录得到的cDNA。

在本发明的一些具体实施方案中，所述能够特异性EGR-1基因转录产物的引物组合包括具有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的上游引物和/或具有SEQ IDNO.2所示核苷酸序列的下游引物。

在本发明的一些实施方案中，所述EGR-1蛋白的检测试剂为质谱鉴定试剂、抗体或其抗原结合片段。

在本发明的一些具体实施方案中，所述抗体为羊抗鼠EGR-1抗体。

本发明的第二方面提供一种预测对象肝移植术后排斥反应的试剂盒，所述试剂盒包括EGR-1基因转录产物的检测试剂和/或EGR-1蛋白的检测试剂。

在本发明的一些实施方案中，所述试剂盒包括EGR-1基因转录产物的检测试剂而不包括EGR-1蛋白的检测试剂。

在本发明的一些实施方案中，所述EGR-1基因转录产物的检测试剂包括能够特异性EGR-1基因转录产物的引物组合。

在本发明的一些具体实施方案中，所述转录产物包括由EGR-1mRNA逆转录得到的cDNA。