[发明专利]醋酸兰瑞肽的合成方法

权利要求书

1.一种醋酸兰瑞肽的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1，以Fmoc保护的氨基树脂为固相合成的载体，将其按照氨基酸顺序依次与以下Fmoc保护的氨基酸Fmoc-Thr(OtBu)-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-D-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH及Fmoc-D-2-Nal-OH进行缩合反应，得到Fmoc保护多肽树脂；

S2，切割所述Fmoc保护多肽树脂中的树脂，得到线性肽链；

S3，将所述线性肽链溶解在第一溶剂中，形成肽链溶解液，其中，所述肽链溶解液的浓度为200～300mg/ml；将所述肽链溶解液以滴加的方式加入至氧化剂体系中，以进行合环反应，形成合环产物，其中，所述氧化剂体系与所述肽链溶解液的体积比为4～10:1，所述肽链溶解液的滴加速度为1～60ml/min，且采用HPLC监控反应进程；

S4，脱除所述合环产物的侧链Fmoc保护基，得到兰瑞肽；

S5，对所述兰瑞肽进行醋酸胺转盐，得到所述醋酸兰瑞肽。

2.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述步骤S1包括：

溶胀步骤：对所述Fmoc保护的氨基树脂进行溶胀，得到溶胀树脂；

脱保护步骤：对所述溶胀树脂进行Fmoc脱保护，得到活性树脂；

氨基酸活化步骤：将所述Fmoc-Thr(OtBu)-OH在缩合体系中活化，得到活化氨基酸；

缩合步骤：将所述活性树脂与所述活化氨基酸进行缩合反应，荫三酮监控反应终点，得到第一缩合产物；

氨基酸依次连接：对所述第一缩合产物分别循环执行所述脱保护步骤、所述氨基酸活化步骤及所述缩合步骤，以依次将所述Fmoc-Cys(Trt)-OH、所述Fmoc-Val-OH、所述Fmoc-Lys(Boc)-OH、所述Fmoc-D-Trp(Boc)-OH、所述Fmoc-Tyr(tBu)-OH、所述Fmoc-Cys(Trt)-OH及所述Fmoc-D-2-Nal-OH缩合连接至所述第一缩合产物上，得到所述Fmoc保护多肽树脂。

3.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，针对不同的所述Fmoc保护的氨基酸，各所述氨基酸活化步骤中采用的所述缩合体系分别独立地选自以下A/B体系中的一种：HOBT/DIC、HOAT/DIC、Oxymapure/DIC、HATU/DIPEA、HBTU/DIPEA、TBTU/DIPEA或PyBOP/DIPEA。

4.根据权利要求3所述的合成方法，其特征在于，所述氨基酸活化步骤中，先将待反应的所述Fmoc保护的氨基酸与缩合剂、第二溶剂混合并溶解，得到混合溶液，所述缩合剂为Oxymapure；然后将所述混合溶液降温至0～5℃，再向其中加入活化剂，活化5～10min后，得到所述活化氨基酸，所述活化剂为DIC。

5.根据权利要求3所述的合成方法，其特征在于，针对各所述Fmoc保护的氨基酸的缩合反应过程中，所述Fmoc保护的氨基酸、所述缩合体系及反应对应的Fmoc树脂之间的摩尔比为2～5:2～5:1，且所述Fmoc树脂的摩尔数以其携带的Fmoc保护氨基的摩尔数计。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的合成方法，其特征在于，各缩合反应过程中，反应温度为10～35℃，反应时间为0.5～4h。

7.根据权利要求1至5中任一项所述的合成方法，其特征在于，所述步骤S3中，所述氧化剂体系为以下体系中的任一种：碘的DCM溶液、铁氰化钾的水溶液、H₂O₂的水溶液、通有空气或氧气的DMSO。