[发明专利]表达抗VEGF融合蛋白的AAV病毒载体及其应用

权利要求书

1.一种表达盒，其特征在于，所述表达盒从5’-3’端具有式I结构：

Z1-Z2-Z3-Z4(I)

式中，各“-”独立地为键或核苷酸连接序列；

Z1核苷酸序列如SEQ ID NO.：4所示；

Z2核苷酸序列如SEQ ID NO.：5所示，并且Z1和Z2通过键连接；

Z3为编码抗VEGF融合蛋白的核苷酸序列；和

Z4为任选的hGHpA(human growth hormone poly(A)tail)序列，

其中，所述的抗VEGF融合蛋白包括VEGFR1的胞外第二结构域、VEGFR2的胞外第三结构域。

2.如权利要求1所述的表达盒，其特征在于，所述抗VEGF融合蛋白的核苷酸序列如SEQID NO.:6所示。

3.如权利要求1所述的表达盒，其特征在于，所述抗VEGF融合蛋白的序列如SEQ IDNO.:1所示。

4.一种载体，其特征在于，所述载体含有权利要求1所述的表达盒。

5.一种腺相关病毒载体，其特征在于，所述腺相关病毒载体含有如权利要求1所述的表达盒。

6.如权利要求5所述的载体，其特征在于，所述腺相关病毒为AAV2。

7.如权利要求5所述的载体，其特征在于，所述腺相关病毒载体具有式II结构：

A1-Z1-Z2-Z3-Z4-A2-A3(II)

式中，各“-”独立地为键或核苷酸连接序列；

A1为L-ITR序列；

Z1核苷酸序列如SEQ ID NO.：4所示；

Z2核苷酸序列如SEQ ID NO.：5所示，并且Z1和Z2通过键连接；

Z3为编码抗VEGF融合蛋白的核苷酸序列，所述抗VEGF融合蛋白的序列如SEQ ID NO.:1所示；

Z4为hGHpA序列；

A2为R-ITR序列；

A3为任选的标签序列。

8.如权利要求5所述的载体，其特征在于，所述腺相关病毒载体的序列如SEQ ID NO.:2所示。

9.一种宿主细胞，所述宿主细胞含有权利要求4所述的载体或权利要求5所述的腺相关病毒载体，或其染色体中整合有外源的权利要求1所述的表达盒。

10.如权利要求9所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞选自下组：HEK细胞、感光细胞、双极细胞、水平细胞、神经节细胞、或其组合。

11.如权利要求10所述的宿主细胞，其特征在于，所述的感光细胞包括视锥细胞和/或视杆细胞。

12.一种如权利要求4所述的载体或权利要求5所述的腺相关病毒载体的用途，用于制备一制剂或组合物，所述制剂或组合物用于治疗VEGF相关眼部疾病，其中所述VEGF相关眼部疾病为黄斑变性和/或糖尿病视网膜病变。

13.如权利要求12所述的用途，其特征在于，所述VEGF相关眼部疾病为湿性年龄相关性黄斑变性。

14.一种药物制剂，其特征在于，所述的制剂含有(a)权利要求4所述的载体，以及(b)药学上可接受的载体或赋形剂。

15.一种药物制剂，其特征在于，所述的制剂含有(a)权利要求5所述的腺相关病毒载体，以及(b)药学上可接受的载体或赋形剂。