[发明专利]一种天然Rakicidins类化合物Rakicidin B1-2及其发酵提取方法

说明书

本发明属于天然化合物技术领域，具体涉及一种天然Rakicidins类化合物Rakicidin B1‑2及其发酵提取方法。本发明从海洋小单孢菌发酵液中分离得到新的Rakicidins组分Rakicidin B1‑2，该化合物结构与已知的Rakicidin B1相比，在于11、14位开环，且在11位接入乙氧基。本发明天然化合物Rakicidin B1‑2对常氧和乏氧条件下培养的人结肠癌细胞HCT‑8和人胰腺癌细胞PANC‑1均具有一定的体外抑制作用，对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌、艰难梭菌和万古霉素耐药粪肠球菌等10株厌氧菌均具有一定的抑制活性，是一种结构新颖活性较好的次级代谢产物，具有较高的药用价值。

技术领域

本发明属于天然化合物技术领域，具体涉及一种天然Rakicidins类化合物Rakicidin B1-2及其发酵提取方法。

背景技术

目前，已从海洋微生物的代谢产物中分离出几百种生物活性物质，其中部分是可能有临床应用价值的具有抗肿瘤活性或抑菌活性的抗生素，Rakicidins化合物即是其中一类重要的化合物，目前已报道从小单孢菌和链霉菌中发现了一系列具有抗肿瘤活性或抑菌活性的Rakicidins化合物。

近年来，文献已报道海洋Micromonospora sp.FIM 02-523能够产生包括Rakicidin A、B、B1等在内的一系列具有抗肿瘤活性的脂肽类化合物。2006年，本课题组在国内首先报道从该株小单孢菌中分离到化合物Rakicidin A和B。研究发现，Rakicidin A具有卓越的乏氧选择性抗肿瘤细胞活性，在乏氧条件下抗结肠癌HCT-8细胞活性是常氧条件下的17.5倍，被许多同行认为是一个极富开发前景的抗乏氧肿瘤细胞及抗CSC药物；而Rakicidin B的体外抗肿瘤活性考察也显示，其对肿瘤细胞株K562、L929的生长有明显抑制作用。2016年本课题组又得到一种新的化合物RakicidinB1，实验采用移植人结肠癌HCT-8肿瘤斑马鱼模型测试了Rakicidin A、B、B1的体内抑瘤活性，结果表明，Rakicidin A、B、B1均对斑马鱼体内的HCT-8细胞移植瘤均有抑制活性，且初步试验表明，其抗乏氧肿瘤细胞是基于其能有效抑制HIF-1(乏氧诱导因子-1)的表达。在先研究进一步测定了Rakicidin A、B、B1化合物对HCT-8、MGC803、A549、A375、HepG2和CASKI五种人肿瘤细胞株的细胞毒活性，结果显示，已分离的三个化合物对这些肿瘤细胞株均具有显著的抑制活性。2018年，本课题组又从海洋Micromonospora sp.FIM 02-523菌株的代谢物中分离纯化到另外三个新化合物Rakicidin G、H、I，活性实验结果显示，Rakicidin G、H、I化合物均对人结肠癌细胞HCT-8和人胰腺癌细胞PANC-1有较强的细胞毒活性，且在乏氧条件下更强，并且三个化合物对多种革兰氏阳性厌氧菌也有较好的抑制活性。可见，Rakicidins化合物具有极好的临床应用前景。

发明内容

为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种天然Rakicidins类化合物Rakicidin B1-2，并进一步公开其发酵提取方法。

为解决上述技术问题，本发明所述的一种天然Rakicidins类化合物RakicidinB1-2及其药学上可接受的盐，所述化合物Rakicidin B1-2具有如下式(Ⅰ)所示的结构：

本发明还公开了一种制备所述天然Rakicidins类化合物Rakicidin B1-2的方法，所述Rakicidin B1-2是由保藏编号为CGMCC No.14823的海洋小单孢菌株Micromonosporasp.FIM-R160609经发酵及分离获得。

具体的，本发明所述海洋小单孢菌株Micromonospora sp.FIM-R160609保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.14823，保藏日期为2017年10月16日。