[发明专利]一种检测用试剂盒在审
| 申请号： | 201910737787.2 | 申请日： | 2019-08-12 |
| 公开（公告）号： | CN112391452A | 公开（公告）日： | 2021-02-23 |
| 发明（设计）人： | 张辉 | 申请（专利权）人： | 新开源汇诚（武汉）医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 冯子玲 |
| 地址： | 430050 湖北省武汉市汉阳区金龙南路和*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 试剂盒 | ||
1.一种检测用试剂盒，其特征在于，所述检测用试剂盒用于扩增IL-6基因并对扩增产物进行测序，试剂盒包括IL-6上下游扩增引物、DNA聚合酶、扩增缓冲液和dNTPs。
2.根据权利要求1所述的检测用试剂盒，其特征在于，所述试剂盒待扩增的IL-6一侧序列如序列表SEQ ID NO：1所示。
3.根据权利要求1所述的检测用试剂盒，其特征在于，所述试剂盒待扩增的IL-6另一侧序列如序列表SEQ ID NO：2所示。
4.根据权利要求1所述的检测用试剂盒，其特征在于，所述方法中用于扩增如序列表SEQ ID NO：1所示片段的上游引物序列如序列表SEQ ID NO:3所示。
5.根据权利要求1所述的检测用试剂盒，其特征在于，所述方法中用于扩增如序列表SEQ ID NO：2所示片段的上游引物序列如序列表SEQ ID NO:4所示。
6.根据权利要求1所述的检测用试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒的检测位点包括174位点、572位点和597位点。
7.根据权利要求1所述的检测用试剂盒，其特征在于，扩增方法采用的扩增体系为50μL的PCR体系，具体包括：
1×PCR buffer 2μL；
Mg2+(25mmol/L)1μL；
dNTPs(25mmol/L)0.6μL；
Taq酶(5U/μL)0.3μL；
模板DNA 2μL；
上下游引物(10μmol/L)各1μL；
无菌双蒸水补齐至50μL。
8.根据权利要求1所述的检测用试剂盒，其特征在于，所述扩增方法的具体扩增条件为：94℃预变性5min；然后94℃变性30s，62℃退火90s，72℃延伸50s，40个循环。
9.根据权利要求1所述的检测用试剂盒，其特征在于，所述扩增方法还包括全血扩增缓冲液，缓冲液含有100mmol/L Tris-HCl，50mmol/L KCl，pH 9.3～9.5。
10.一种IL-6基因的通用检测方法，其特征在于，所述检测方法采用如权利要求1～9任一项所述的检测用试剂盒检测。
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