[发明专利]一种基于天然硅藻外壳和藻胆蛋白的材料及应用有效
申请号: | 201910738797.8 | 申请日: | 2019-08-08 |
公开(公告)号: | CN110292635B | 公开(公告)日: | 2021-07-16 |
发明(设计)人: | 赵华伟;蒲洋;魏梦娇;李文军;秦松 | 申请(专利权)人: | 鲁东大学 |
主分类号: | A61K41/00 | 分类号: | A61K41/00;A61K47/69;A61P35/00 |
代理公司: | 北京惠智天成知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11681 | 代理人: | 袁瑞红 |
地址: | 264025 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 天然 硅藻 外壳 蛋白 材料 应用 | ||
1.一种基于天然硅藻外壳和藻胆蛋白的材料,其特征在于,所述材料由以下制备方法制备而成:
(1)收集硅藻藻体,去除硅藻藻体的有机质获得纯净硅壳;
(2)处理硅壳使其烷基化,得烷基化硅壳;
(3)配制藻胆蛋白溶液:将提取的藻胆蛋白溶解于pH值为6.0-7.4的PBS缓冲液中,得到浓度为0.05~0.4mg/mL的藻胆蛋白溶液;所述PBS缓冲液的配方为:氯化钠,8g/L;氯化钾,0.2g/L;磷酸氢二钠,1.44g/L;磷酸二氢钾,0.24g/L;
(4)将所述烷基化硅壳放入上述PBS缓冲液中,4℃条件下,用1~5mL 1.6mmol/L的磺基琥珀酰亚氨基辛二酸酯处理5~7h,以及上述PBS缓冲液清洗两遍,7000~15000rpm离心30~40min,弃上清,得沉淀;
(5)经过步骤(4)处理的烷基化硅壳与过量藻胆蛋白溶液混合均匀,在4℃下处理一夜;然后在4℃下,再使用上述PBS缓冲液清洗两遍,7000~15000rpm离心30~40min,弃上清,得到基于天然硅藻外壳和藻胆蛋白共价组装的材料。
2.根据权利要求1所述的材料,其特征在于,步骤(1)所述硅藻藻体的培养方法:在f/2海水培养基中添加30毫克/升硅酸钠,调节pH至7.8-8.0,接种硅藻藻种,在光照培养箱中培养,培养温度25℃,12h,600Lux连续光照,12h黑暗处理,定期通过沉淀法采收硅藻藻体。
3.根据权利要求1所述的材料,其特征在于,步骤(1)所述去除硅藻藻体的有机质获得纯净硅壳的方法为:将采收的硅藻藻体于烧杯中沉降6~15h,吸走上清,加入10~110mL蒸馏水并吹打,然后静置1~8小时,吸取上清,再加入100~1000mL蒸馏水,室温下静置4~9天,吸走上清,加入15~85mL双氧水,避光60~90℃水浴处理2~10h,即得。
4.根据权利要求1所述的材料,其特征在于,步骤(2)所述烷基化硅壳的制备方法为:将去除有机质的纯净硅壳,用Piranha溶液在70~80℃下处理30min,用去离子水清洗两遍;80℃下,用2~5mol/L HCl溶液处理过夜,7000~15000rpm离心30min,弃上清,去离子水清洗两遍;再放入无水乙醇中用5%的3-氨丙基三甲氧基硅烷浸泡一小时,7000~15000rpm离心30min,弃上清;沉淀用无水乙醇清洗两遍,在恒温干燥箱中80~100℃处理10~30min,用无水乙醇和上述PBS缓冲液清洗两遍,即得。
5.根据权利要求4所述的材料,其特征在于,所述Piranha溶液中双氧水和浓硫酸的体积比为1∶4~8。
6.根据权利要求1所述的材料,其特征在于,步骤(3)所述提取的藻胆蛋白纯度>90%。
7.权利要求1-6任一项所述的材料在制备光疗治瘤用光敏剂中的应用。
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