[发明专利]一种用于构树青贮的构树乳酸菌及用途

说明书

本发明公开了一种用于构树青贮的构树乳酸菌及用途，在超净工作台上准确称取构树原料样品，放入生理盐水的三角瓶中封口、震荡，使乳酸菌充分分散、静置，即成10^‑1的稀释液；吸取10^‑1的稀释液，加入装有灭菌的生理盐水的离心管中，充分混匀后，即成10^‑2稀释液；用同样方法连续稀释，制成10^‑4、10^‑5......10^‑N系列稀释菌液；培养皿灭菌后加入无菌MRS培养基，然后再分别从10^‑1、10^‑3、10^‑5稀释液管中吸取滴在培养基表面，恒温培养箱培养后取出，用MRS培养基连续纯化5次，即得提取的乳酸菌菌株。与现有技术相比，本发明从构树原料上筛选的株乳酸菌能够很好的改善构树青贮料的青贮效果，具有推广应用的价值。

技术领域

本发明涉及农业技术领域，尤其涉及一种用于构树青贮的构树乳酸菌及用途。

背景技术

随着畜牧业的发展，饲料缺乏是中国畜牧业发展的主要制约因素。新饲草资源的开发是应对中国动物产品需求增长的重点。构树(Broussonetia papyrifera L.)是桑科(Moraceae)的落叶乔木或灌木，原产于东南亚大陆和东亚，包括中国台湾，在中国广泛分布(约30万公顷)。它具有以下特征：药用植物，抗氧化剂和抗癌活性，适应或抵抗交通压力，金属吸附剂，具有茂盛枝叶的快速生长树，适应性和耐受性强。此外，它具有高营养价值，富含蛋白质 (18-24％)和黄酮类化合物，构树叶已被用作动物饲养，具有非常规饲料潜力。重要的是，以前的研究表明，奶牛饲料中添加10-15％的构树青贮饲料可能会增强奶牛的免疫和抗氧化功能，并增加牛奶中的PUFA浓度。然而，生物量收获是季节性的，在雨季积累较多，构树的含水量高达68％。因此，与传统的干草制作相比，青贮更适合保存构树。

青贮是一种保护饲料营养的有效方法。在青贮期间，乳酸菌(LAB)将水溶性碳水化合物(WSC)转化为有机酸，主要是在厌氧条件下的乳酸，结果降低pH 值以保护饲料免受不良微生物的侵害。因此，青贮是一种微生物驱动的过程，乳酸菌在青贮过程中起着重要作用。然而，在构树的青贮过程中，由于原料上附着的乳酸菌数量极少，因此导致其青贮效果不好。

为了解决构树原料乳酸菌少导致青贮失败的难题，需要额外添加乳酸菌，然而常规的商用乳酸菌的添加并不能很好的改善其青贮效果，因此从虉草青贮料上提取乳酸菌，进行培养，然后添加到构树青贮料中，目前关于其构树青贮的研究比较少，而专用于构树青贮的乳酸菌添加剂还未见报道。由于其原料附着的乳酸菌含量极低，导致其青贮效果不好。目前市场上的商用乳酸菌并不能很好的改善构树的青贮效果，因此，需要在其他植物原料上提取乳酸菌，以此添加到构树青贮料中，以此来改善构树的青贮效果。

发明内容

本发明的目的就在于为了解决上述问题而提供一种用于构树青贮的构树乳酸菌及用途。

本发明通过以下技术方案来实现上述目的：

本发明一种专用于构树青贮的构树乳酸菌，提取方法包括以下步骤：

(1)在超净工作台上准确称取5g构树原料样品，放入装有45ml灭菌的生理盐水的三角瓶中，用封瓶膜封口，放入180r·min^-1的摇床中震荡2h，使乳酸菌充分分散，静置10s～40s，即成10^-1的稀释液；

(2)吸取100μl 10^-1的稀释液，加入装有900μl灭菌的生理盐水的离心管中，充分混匀后，即成10^-2稀释液；

(3)再吸取100μl 10^-2稀释液，加入装有900μl灭菌的生理盐水的离心管中，混匀即成10^-3稀释液；