[发明专利]一种基于半乳糖醛酸酶基因表达对玉米抗旱性鉴定的方法在审
| 申请号： | 201910743382.X | 申请日： | 2019-08-13 |
| 公开（公告）号： | CN110317899A | 公开（公告）日： | 2019-10-11 |
| 发明（设计）人： | 段会军;张建恒;代亮;么大轩 | 申请（专利权）人： | 河北农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 北京德崇智捷知识产权代理有限公司 11467 | 代理人： | 董柏雷 |
| 地址： | 071001 河北省*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 半乳糖醛酸 酶基因表达 玉米 抗旱性鉴定 表达量 抗旱 抗旱性筛选 干旱胁迫 技术支持 抗旱性能 苗期生长 玉米品种 玉米植株 抗旱性 总RNA 检测 | ||
1.一种基于半乳糖醛酸酶基因表达对玉米抗旱性鉴定的方法，其特征在于，包括以下步骤：
选择待评价的玉米品种，在玉米苗期进行干旱胁迫处理，同时设置对照组；
干旱胁迫处理7天后，提取玉米叶片的总RNA；
采用实时荧光定量PCR对提取的总RNA中半乳糖醛酸酶基因表达量进行检测，获得干旱胁迫半乳糖醛酸酶基因的表达量以及对照组半乳糖醛酸酶基因表达量；
计算玉米表达量抗旱指数DIE，依据以下公式：
表达量抗旱系数DCE＝干旱胁迫半乳糖醛酸酶基因表达量÷对照组半乳糖醛酸酶基因表达量；
DIE＝(表达量抗旱系数DCE×干旱胁迫半乳糖醛酸酶基因表达量)÷所有玉米品种干旱胁迫表达量的平均数；
依据玉米表达量抗旱指数DIE对玉米品种抗旱能力进行评价，其中DIE≥1.35为极抗旱(HR)，DIE为1.11～1.34为强抗旱(R)；DIE为0.88～1.10为中等抗旱(MR)；DIE为0.64～0.87为弱抗(S)；DIE≤0.64为极弱抗旱(HS)。
2.根据权利要求1所述的基于半乳糖醛酸酶基因表达对玉米抗旱性鉴定的方法，其特征在于：所述干旱胁迫是控制育苗盘中蛭石的含水量低于20％。
3.根据权利要求1所述的基于半乳糖醛酸酶基因表达对玉米抗旱性鉴定的方法，其特征在于，采用Trizol试剂提取玉米植株第一片展开叶片的总RNA。
4.根据权利要求3所述的基于半乳糖醛酸酶基因表达对玉米抗旱性鉴定的方法，其特征在于，将提取的总RNA进行逆转录成cDNA；然后以cDNA为模板进行实时荧光定量PCR检测。
5.根据权利要求4所述的基于半乳糖醛酸酶基因表达对玉米抗旱性鉴定的方法，其特征在于，所述实时荧光定量PCR检测时，所采用的反应体系每20μl中包括以下组分：1μl的cDNA模板、0.5μl的正、反引物、10μl的SYBR Green mix荧光染料，8μl无菌水。
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