[发明专利]一种溶藻弧菌菌株及其应用

说明书

本发明属于水产养殖技术领域，尤其涉及一种溶藻弧菌菌株及其应用。该溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)菌株保藏编号为GDMCC No:60730。本发明还提供一种抗水产弧菌的组合物，其活性成分为灭活或减活的上述溶藻弧菌菌株。能够大大提高水产鱼类的抗病原菌感染力。

技术领域

本发明属于水产养殖技术领域，尤其涉及一种溶藻弧菌菌株，进一步涉及由该溶藻弧菌菌株制备的灭活疫苗，及它们在预防或治疗由溶藻弧菌引起的各种疾病中的应用。

背景技术

弧菌(Vibrion)广泛分布于海水养殖环境中，一直被认为是许多海水鱼、虾及蟹类的重要致病菌，是一类革兰氏阴性，具有鞭毛，能运动，无芽孢和荚膜的杆状细菌。多数弧菌是兼性厌氧菌，对营养要求不高，嗜盐，在含有NaCl的蛋白胨水中就可以生长，适宜在pH为8.0-9.0的碱性环境中生长。目前，已发现对海水鱼类具有致病性的弧菌主要是副溶血弧菌、溶藻弧菌、鳗弧菌和哈维氏弧菌等十几种。

溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)，属弧菌科(Vibrionaceae)，弧菌属(Vibrio)，是由Miyamoto在1961年定名，在弧菌选择培养基TCBS(硫代硫酸盐柠檬酸胆盐蔗糖琼脂)上菌落颜色呈黄色，菌落形态为圆形、凸起、光滑，直径2-3mm，菌落粘稠而不易挑取，无荚膜和芽孢，具有鞭毛，是革兰氏阴性短杆菌，能在液体培养基和固体培养基中移动。溶藻弧菌为嗜温菌，适宜温度为17-35℃，广泛分布于海水及河口中，数量居海水中各种弧菌之首，溶藻弧菌对海水鱼类的致病过程包括粘附、侵染、定居和繁殖，在海水鱼生长过程中进行侵染，对机体造成细胞、组织损伤，其代谢产物可以破坏机体局部或全身的正常代谢或机能，而导致疾病的产生；如溶藻弧菌致病的黑鲷鱼会出现表皮溃烂、出血、眼球突出、腹部肿胀肝脏充血，肾脏苍白等症状。

黑鲷(Sparus macrocephlus)，属鲈形目(Perciformes)，鲷科(Sparidae)，是名贵海产鱼类之一，具有多种适合人工养殖的生物学特性，如适温，适盐性广，食谱杂，抗病力较强，生长较迅速等。然而，随着黑鲷养殖规模的不断扩大及数量的增加，海水中病原数量越来越多，导致黑鲷鱼各种病害的发生越来越频繁，其中细菌病害特别是弧菌病害，已给黑鲷养殖生产造成了极大的经济损失，严重阻碍了黑鲷养殖业的发展。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)菌株。

因此，本发明的目的之一在于提供上述溶藻弧菌菌株在制备抗水产弧菌疫苗中的应用。

本发明的另一目的在于提供抗水产弧菌疫苗。

本发明所采用的技术方案如下文所述。

一种溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)菌株，该菌株于2019年07月16日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:60730，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

进一步地，本发明从病症特征明显，濒临死亡的黑鲷鱼的肝肾肺中筛选分离获得所述溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)菌株，经形态学特征、生理生化特征、分子生物学特征鉴定为Vibrio alginolyticus。

进一步地，所述溶藻弧菌菌株形态特征为：

在TCBS培养基上菌落颜色呈黄色，菌落形态为圆形、凸起、光滑，菌落粘稠而不易挑取。

进一步地，所述溶藻弧菌菌株生理生化特征为：

经革兰氏染色后菌体呈紫色，为革兰氏阴性杆菌，两端钝圆；能发酵蔗糖、甘露糖，在无盐胨水中不生长，在3％-10％的NaCl胨水培养基上生长；V-P(葡萄糖磷酸盐胨水反应)和赖氨酸脱羧酶反应呈阳性；葡糖糖产气和精氨酸双水解酶反应呈阴性。