[发明专利]一种金枪鱼皮胶原蛋白肽铁螯合物的制备方法

说明书

本发明涉及海洋生物提取物应用领域，尤其涉及一种金枪鱼皮胶原蛋白肽铁螯合物的制备方法。其包括：1）蛋白浆制备：对金枪鱼皮进行破碎、加酸液匀浆，高压处理后得到蛋白浆；2）多重酶解：向蛋白浆中加入酶，对其进行升温酶解和高温灭酶得到酶解液；3）多重过滤：对酶解液进行过滤除杂，再经过有机膜过滤和透析截留，取透析袋中的保留液得到肽溶液；4）螯合反应：向肽溶液中加入酸调节pH值至酸性，再加入亚铁盐发生螯合反应后离心得到分层溶液；5）分离产物：取分层溶液的上清液，加入乙醇并低温沉淀，离心分离固态产物，对固态产物进行干燥和杀菌后即得到产物金枪鱼皮胶原蛋白肽铁螯合物。本发明提高了肽铁螯合物的得率，并且简洁高效。

技术领域

本发明涉及海洋生物提取物应用领域，尤其涉及一种金枪鱼皮胶原蛋白肽铁螯合物的制备方法。

背景技术

金枪鱼(Tunas)又叫鲔鱼、吞拿鱼，属鲈形目鲭科，作为一种深海鱼类，金枪鱼不仅肉味鲜美，而且营养价值非常高，富含蛋白质，不饱和脂肪酸和维生素，以纯天然，营养价值高而享誉国际市场。金枪鱼的主要加工种类有蓝鳍金枪鱼，长鳍金枪鱼，黄鳍金枪鱼和大眼金枪鱼。浙江省是我国金枪鱼加工中心，拥有全国最大的金枪鱼加工基地，金枪鱼除了鲜销夕卜，其加工产品的附加值非常高，一般经过冷冻处理用于制作寿司及罐装食品。而长期以来，国内外对于金枪鱼肉片加工的副产物，内脏，鱼皮，鱼骨仅作简单的处理或作为垃圾直接丢弃。目前，面对全球金枪鱼渔获量减少的趋势，研究金枪鱼副产物综合利用，变废为宝，开发出高附加值的产品，不仅对于金枪鱼综合开发和保护环境、减少资源浪费有重要意义，而且可以拓展金枪鱼产业链的延伸和提高金枪鱼生产企业的经济效益。

另一方面，缺铁性贫血是严重影响人类健康的公共卫生问题之一，患者约占全球人口的10%～30%，尤其以孕妇、哺乳期妇女、青春期女性和儿童发病率较高。造成缺铁性贫血的主要原因包括铁的需要量增加而摄入量相对不足、铁吸收障碍及利用率降低、失血导致铁流失过多等。多肽铁是目前补铁制剂中一种理想的补铁剂，是以蛋白质水解产生的多肽为原料，与铁离子络合形成的螯合物，因其含有人体必需的铁离子和促进铁离子吸收的有机成分，其吸收率是无机铁补铁剂的4-5倍。因此，回收利用金枪鱼皮制备补铁剂具有重要意义。

中国专利局于2014年7月2日公开了一种乌鸡肽铁螯合物生物补铁剂的制备方法的发明专利授权，授权公开号为CN102860512B，其包括在乌鸡肽溶液中加入抗坏血酸，并且在pH3-6的条件下，将乌鸡肽溶液与亚铁盐恒温下螯合。通过傅里叶红外光谱对螯合物进行结构鉴定，乌鸡肽铁螯合物中亚铁离子与多肽中NH²⁺以及-COO^-形成配位键，说明乌鸡肽铁螯合物是一种新型肽铁螯合物。但在该技术方案中，需要利用较高纯度的乌鸡肽配制乌鸡肽溶液，成本低廉的优点不存在，并且其螯合反应后直接沉淀过滤容易引入较多的杂质，整体纯度较低，且乌鸡肽本身具有多种用途，并未实现回收利用的目的。

中国专利局于还于2015年7月8日公开了乌鸡肽铁螯合物粉制备方法的发明专利授权，授权公开号为CN103652892B，其步骤包括：乌鸡肉浆水解后过滤得到乌鸡活性肽溶液；把乌鸡活性肽溶液转入真空反应釜中，与氯化亚铁反应得到乌鸡肽铁螯合物；然后经陶瓷滤膜过滤、乙醇洗涤、喷雾干燥，并在喷雾干燥时采用紫外光杀菌，最后真空包装得到乌鸡肽铁螯合物粉。该方案直接从乌鸡肉中水解提取活性肽并制成溶液，加入亚铁盐制备肽铁螯合物，但在乌鸡活性肽溶液中存在较多的杂质，其仅简单过滤无法去除，后续的陶瓷滤膜过滤也会残留较多的杂质，存在所制得肽铁螯合物纯度偏低的问题，并且该方法仅用单一酶解反应，获得的多肽量较少，且多肽分子量较大，不利用肽铁螯合物的吸收。