[发明专利]一种去除D组分提高酒石酸泰乐菌素质量的方法

说明书

本发明涉及一种去除D组分提高酒石酸泰乐菌素质量的方法，该方法是在现有酒石酸泰乐菌素生产工艺中的反萃取之前加入酸洗液进行酸洗，加入酸的量使萃取液pH达到4.5‑5.5，酸洗完成后排去酸洗液，然后进行反萃取。本发明通过酸洗，酸洗液与溶媒相混合后，因泰乐菌素各组分在酸性条件下萃取速率不同，从而能将部分泰乐菌素D组份溶解至酸洗液中，通过酸洗液去除或回收再利用，而尽可能的将A组份得到保留。在下步反萃取中可以有效的提高产品A组分的含量。通过本发明可以有效降低产品D组份2.0个百分点，反萃取结束后进行结晶，可将泰乐菌素A组分提纯，将其他杂质留到母液中。

技术领域

本发明涉及一种去除D组分提高酒石酸泰乐菌素质量的方法，属于生物兽药制备技术领域。

背景技术

泰乐菌素首先由美国学者Hamill等人从泰国土壤中分离而得，产生菌有弗氏链霉菌 (S.fradiae，NRR2702，2703)，龟裂链霉菌(S.rimosns)和吸水链霉菌(S.hygro-scopicus)；泰乐菌素有效成分包括：泰乐菌素A(真泰乐菌素)、泰乐菌素B(脱碳酶糖泰乐菌素Desmycosin)、泰乐菌素C(大菌素mucrosin)和泰乐菌素D(雷洛霉素Relomysin)，A 组分≥80％，总组分A+B+C+D≥95％，效价800u/mg。泰乐菌素各有效成分的化学结构式见下表I ：

表I

泰乐菌素的发酵以豆油为主要碳源。葡萄糖对泰乐菌素的生物合成有明显抑制作用，若分化期发酵过程中存在过量的葡萄糖，则促进ATP水平的上升，从而抑制泰乐菌素的生长，而豆油中的油酸、亚油酸经过甲基化形成甲基油酸，它是泰乐菌素的前体物质，能促进其生物合成。因此，在发酵过程中主要以补加豆油来满足产生菌对碳源的需要。而严格控制豆油的加量是决定发酵成败的关键：豆油含量低，不利于菌丝生长，而含量过高，则不能完全利用，产生脂肪酸积累，造成pH值下降，由此抑制了大菌素C甲基转移酶的活性，影响了组份含量。另外，泰乐菌素发酵过程中温度、PH、菌丝生产状况和豆油添加量对大菌素C甲基转移酶的活性具特征性指标意义，一直是决定泰乐菌素产量的关键点。

泰乐菌素的发酵应严格控制杂菌污染，若因条件有限或不可避免或因操作、设备等原因造成泰乐菌素发酵液染菌，将导致放罐质量差、有异臭、滤速慢、滤液浑浊、效价降低、残油多，给提炼生产带来很大困难，将直接影响泰乐菌素成品的收率和质量。若发酵液染菌严重，致使其无法处理而被迫倒罐，会造成资源浪费和经济损失。发酵液变质的原因是由于杂菌的侵入，使泰乐菌素产生菌的生长繁殖发生异常。杂菌生长占了优势，它的代谢产物，如各种酶及毒素就会大大抑制泰乐菌素产生菌的正常生长，促使泰乐菌素菌丝体自溶。发酵液中就有大量的胶体蛋白存在，致使发酵液变得浑浊，滤速减慢而难予处理。

泰乐菌素各组分除了具有共同的16元环太内酯外，在其侧链的碳霉氨糖上都有一个亚氨基，故其显弱碱性。在碱性条件下，以泰乐菌素碱的形式存在，易溶于有机溶媒；而在酸性条件下与酸结合成盐的形式，易溶于水。根据这一特性，目前泰乐菌素的提取工艺一般采用溶媒萃取法。具体来讲，发酵液经固液分离得到滤液，碱化至pH值9～10后用溶媒萃取到有机相，然后用酒石酸反萃取到水相，最后经Ca(OH)₂中和除去过量的酸，活性炭脱色，空气脱溶，再经纳滤和喷雾干燥后得到酒石酸泰乐菌素。

在泰乐菌素生产中产品A组分偏低是制约泰乐菌素产品质量的瓶颈，通常泰乐菌素A组分在90％-91％。因此，提高产品A组分是泰乐菌素产品发展的重点。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种去除D组分提高酒石酸泰乐菌素质量的方法，本发明的方法可以有效去除杂质，提高泰乐菌素产品有效组分(A组分)的纯度，且该方法工艺简单，成本低，工序短，易于推广利用。经过该发明可以将泰乐菌素A组分提高至93％-94％。

本发明的技术方案如下：