[发明专利]一种止得咳颗粒HPLC指纹图谱及其质量分析方法

说明书

本发明公开了一种止得咳颗粒HPLC指纹图谱及其质量分析方法，所述质量分析方法是运用聚类分析法对止得咳颗粒样品的指纹图谱进行分析，将多个批次样品的共有峰的峰面积经归一化处理后作为变量，导入IBM SPSS Statistics20.0软件，选择离差平方和法，以欧式距离作为样品的度量标准，得出树状聚类图，分别将多批次止得咳颗粒进行分类，评价止得咳颗粒的质量。能够更加精准的评价止得咳颗粒的综合质量得分，为建立完善的止得咳颗粒质量标准提供依据，以期建立止得咳颗粒的质量控制与评价体系。

技术领域

本发明属于药品分析技术领域，尤其是涉及一种止得咳颗粒HPLC指纹图谱及其质量分析方法。

背景技术

止得咳颗粒系广西中医药大学附属瑞康医院的院内制剂，是由龙脷叶、射干、桔梗、黄芩、柴胡等十味药材组成的中药复方制剂，具有宣肺止咳、化痰利咽的功效。该颗粒剂的相关研究尚处在初级阶段，至今有关止得咳颗粒整体质量控制的研究并未完善。现行的质控方法仅用简单的薄层定性鉴别以及黄芩苷、次野鸢尾黄素2种化学成分表征该制剂的质量，标准相对较低，无法表征该复方制剂化学物质成分群，难以全面控制止得咳颗粒的内在质量，一定程度上限制了该制剂的应用和发展。

近年来，中药指纹图谱分析技术的广泛应用推动了其发展，不仅提升了中药材和中成药的质量标准也让产品整体质量水平得以进步。但目前没有关于止得咳颗粒指纹图谱的研究，且目前对指纹图谱的评价多采用相似度分析作为基本评价方法，有部分人指出指纹图谱中峰面积过大及峰高较高的主导色谱峰会对相似度的准确性产生一定的影响，但相关方面的研究有限。

因此，现阶段需研究一种止得咳颗粒HPLC指纹图谱，并构建一种质量分析方法，建立完善的止得咳颗粒质量标准提供依据，以期建立止得咳颗粒的质量控制与评价体系。

发明内容

针对上述问题，本发明提供一种止得咳颗粒HPLC指纹图谱及其质量分析方法，建立了止得咳颗粒HPLC指纹图谱，通过多种分析模式为系统评价其内在质量提供依据。

为此，本发明提供的方案是：

一种止得咳颗粒HPLC指纹图谱，其构建方法具体包括如下步骤：

(1)：将止得咳颗粒按照下述提取方法制成待检样，备用；所述提取方法为：取止得咳颗粒，精密加入纯水，定量后置超声仪中超声提取25-30min，取出放冷至室温，用纯水补足失重，于12000-13000r·min^-1下离心10-12min，用0.45μm微孔滤膜滤过上清液，即为待检样备用；所述止得咳颗粒与纯水的质量比为2.0：9-10；

(2)：分别精密称取对照品黄芩苷、次野鸢尾黄素、汉黄芩素、柴胡皂苷d，加甲醇配制得混合对照品溶液；

(3)：将所述待检样、混合对照品溶液分别进行高效液相色谱分析，将待检样的色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，采用中位数法建立止得咳颗粒的HPLC指纹图谱。

进一步地，在步骤(1)中，所述提取方法中的纯水，可替换为甲醇或乙醇。

进一步地，所述混合对照品溶液包括浓度为0.3-0.5mg·mL^-1黄芩苷、浓度为0.015-0.025mg·mL^-1次野鸢尾黄素、浓度为0.003-0.005mg·mL^-1汉黄芩素、0.4-0.5mg·mL^-1浓度为柴胡皂苷d。

进一步地，所述色谱分析的条件设置如下：Agilent ZORBAX Eclipse Plus-C18色谱柱，4.6mm×250mm,5μm，柱温30℃；检测波长为254nm；进样量为10μL；流动相为甲醇和0.2％磷酸溶液，流速0.8mL·min^-1。