[发明专利]聚乙二醇用于动物组织切片油脂染色的应用

说明书

本发明属于病理组织切片制作技术领域，具体涉及聚乙二醇用于动物组织切片油脂染色的应用。利用聚乙二醇优秀的水溶性特点，采用聚乙二醇作为脱水剂，在脱水过程中同时包埋实现介质的渗透、包埋成形，形成的组织包埋块具有石蜡块的外形特点，同时组织包埋块经水洗即可去除包埋介质，无需使用有机溶剂处理，避免了有机溶剂处理导致脂类流失的问题。本发明所述方法制备的组织切片厚度为3～5μm，避免了冰冻切片过厚导致组织叠片的问题。本发明所述方法制备的组织切片经油红O染色后，因聚乙二醇脱水渗透，使大部分脂滴完好保存于细胞质中，避免了冰冻切片中脂滴发生移位的问题，也避免了冰冻切片中因低温产生冰晶导致组织结构不完整的问题。

技术领域

本发明属于病理组织切片制作技术领域，具体涉及聚乙二醇用于动物组织切片油脂染色的应用。

背景技术

脂质是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，主要是指中性脂肪。正常情况下，除脂肪细胞外，其他细胞内一般不见或仅有少量脂滴。当发生病变时，细胞中会出现脂滴或脂滴明显增多，特别是心、肝、肾等实质器官发生脂肪变性时，胞浆内会出现大小不一的空泡，需用脂肪染色鉴别空泡是属于脂肪变性还是水样变性或糖原贮留。另外，动脉粥样硬化时，内皮细胞下的脂质沉积，可用脂肪染色显示脂质。

脂类易溶于有机溶剂，不能用石蜡切片进行诊断检测。因为石蜡切片在制片、染色过程中需经过酒精、二甲苯等有机溶剂进行脱蜡处理，会将脂类等清除。因此石蜡切片不可用于脂类的病理检测。

在日常病理检测及科研中，脂肪染色常采用冰冻切片制片，油红O染色。冰冻切片制备是将组织经OCT包埋剂包埋成形后，在-20℃环境下用冰冻切片机将组织块切成5～15μm的切片，然后进行油红O染色。染色过程中由于切片过厚，染色及附贴切片时容易产生折叠，影响切片质量。热胀冷缩现象会导致脂滴聚集在一起，使脂肪细胞呈“空泡状”，染色结果呈阴性改变，并且切片不能长久保存，需及时观察，存在一定的局限性。

碳蜡，又名聚乙二醇，是一种水溶性高分子化合物，有一系列从低到中等分子量的产品。碳蜡的物理形态可以从无色透明粘稠液(分子量200～700)到白色蜡质半固体(分子量1000～2000)直至坚硬的蜡状固体(分子量3000～20000)。碳蜡完全溶于水，并能和很多物质相溶，有很好的稳定性和表面活性，低毒且无刺激性。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，目的在于提供一种聚乙二醇用于动物组织切片油脂染色的应用。

为实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案为：

聚乙二醇用于动物组织切片油脂染色的应用。

一种利用聚乙二醇进行动物组织切片油脂染色的方法，包括如下步骤：

(1)取动物组织样品，经固定液固定后，流水冲洗，吸水纸吸干水分；

(2)将动物组织样品置于碳蜡I中进行浸蜡处理；

(3)再将动物组织样品置于碳蜡II中进行浸蜡处理；

(4)随后将动物肝脏组织样品放在组织包埋盒中，加入足量熔化的碳蜡II，自然冷却，

待碳蜡凝固成形后，用石蜡切片机切片，切片后常温蒸馏水展片，烤片；

(5)切片无需脱蜡，用蒸馏水稍洗，直接入苏木素染色2min；稍微水洗，0.5％盐酸迅速分化，水洗后0.5％氨水返蓝；然后用70％乙醇轻轻洗切片数秒，油红O染色10min，70％乙醇迅速分化，空气中晾干，甘油明胶封片。

上述方案中，碳蜡I为分子量1000～2000的聚乙二醇。

上述方案中，碳蜡II为分子量1500与分子量1000的聚乙二醇按3:1～1:3混合的聚乙二醇混合物。