[发明专利]一类DNA甲基转移酶1荧光探针及其用途

说明书

本发明属医药技术领域，涉及DNA甲基转移酶1荧光探针，具体涉及式1结构的由邻苯二甲酰亚胺类DNA甲基转移酶1(DNMT1)抑制剂与荧光素通过连接链(L)连接而成的荧光探针及其用途。本发明式1结构的荧光探针，或其药学上可以接受的盐、其立体异构体或互变异构体、或前药，表现出良好的透膜入核能力和与DNMT1的结合能力，可用于制备细胞内及细胞核内的DNMT1的定量检测制剂，为细胞病变尤其是癌变程度提供预测或诊断。

技术领域

本发明属医药技术领域，涉及DNA甲基转移酶1荧光探针，具体涉及一类由邻苯二甲酰亚胺类DNA甲基转移酶1(DNMT1)抑制剂与荧光素通过连接链(L)连接而成的荧光探针，该类荧光探针表现出良好的透膜入核能力和与DNMT1的结合能力，可用于制备细胞内及细胞核内的DNMT1的定量检测制剂，为细胞病变尤其是癌变程度提供预测。

背景技术

研究显示，肿瘤的形成不仅源于基因遗传，同样也受到表观遗传修饰的影响；表观遗传学包括DNA甲基化、组蛋白共价修饰以及mRNA编辑等，其中，DNA甲基化是表观遗传中最主要的一种类型，抑癌基因的甲基化将直接破坏正常细胞的动态平衡，从而诱发癌变。

研究表明，DNA甲基化主要是指在DNA甲基转移酶(DNMTs)的催化作用下，以S-腺苷甲硫氨酸为甲基供体，将DNA的CpG岛上的胞嘧啶转变成5-甲基胞嘧啶，从而导致该基因沉默，丧失功能。DNMTs家族主要包括DNMT1，DNMT2，DNMT3A，DNMT3B，DNMT3L等，其中，DNMT1是目前研究最多的甲基转移酶，研究表明DNMT1的表达量多少与基因甲基化程度之间存在直接相关性，而抑癌基因的甲基化过度程度又与细胞的癌变程度直接相关，因此DNMT1的表达量的多少与细胞的癌变程度之间存在着相关性，即DNMT1表达量越多，细胞癌变程度越大。

目前医疗实践中，对于癌前病变的检测手段较少，且大多耗费人力物力，同时存在着敏感性与特异性较低等问题，如宫颈癌筛查方法中宫颈薄层细胞学检查(thinprepcytologic test，TCT)、高危人乳头瘤病毒(high risk human papillomavirus，HR-HPV)和第二代杂交捕获实验(hybrid capture2，HC2)检测均存在敏感性和特异性较差的问题，常导致不必要的阴道镜转诊等。因此，研制新型的癌前病变检测手段有着重要的实践意义。DNMT1是生物细胞核内一种特异性的甲基转移酶，其表达量的多少一定程度上预示着细胞的癌变程度，因此，实现对DNMT1表达量的检测将可以成为细胞或生物体健康状况的量度，甚至是癌症的预测和警告。

截至目前，关于DNMT1荧光探针的市面上及文献中均未见有报道。基于现有技术的现状，本申请的发明人将DNMT1抑制剂或其配体通过柔性连接链与适当的荧光剂连接，提供一类可通过共聚焦显微镜技术定量检测细胞核中DNMT1含量的荧光探针，本发明可用于与DNMT1高表达的细胞病变，尤其是细胞癌变的预测和诊断。

发明内容

本发明的目的在于基于现有技术的现状，提供一类可通过共聚焦显微镜技术定量检测细胞核中DNMT1含量的荧光探针，本发明中将DNMT1抑制剂或其配体通过柔性连接链与适当的荧光剂连接制成DNA甲基转移酶1荧光探针，本发明可用于与DNMT1高表达的细胞病变，尤其是细胞癌变的预测和诊断。

具体的，本发明的荧光探针具有下述通式1化合物结构，或其药学上可以接受的盐、其立体异构体或互变异构体、或前药：

其中，

L选自取代或未取代的C_1-10亚烃基、取代或未取代的含杂原子的C_1-10杂亚烃基，当L为取代或未取代的含杂原子的C_1-10杂亚烃基时，所述的杂原子选自氧、氮和硫中的一个或多个；当杂原子为多个时，杂原子相同或不同；