[发明专利]一种杜氏盐藻的优化培育方法

说明书

本发明提供了一种杜氏盐藻的优化培育方法，包括正常培养条件的一期培养，以及长时间强光照、低温低、温差大、高盐度、低营养盐的二期培养，一期培养为盐藻细胞提供了适宜的生长环境、可有效促进盐藻细胞生长繁殖、积累结构物质；二期培养为盐藻细胞提供相对逆境的环境，以促进类胡萝卜素的大量积累，同时不会对盐藻细胞造成严重损害。该方法既能促进杜氏盐藻的正常生长繁殖、又能促进杜氏盐藻大量合成和积累类胡萝卜素，适宜在实验室环境或室内大型养殖池中进行广泛应用。

技术领域

本发明属于藻类养殖技术领域，特别涉及一种适用于室内养殖池的杜氏盐藻的优化培育方法。

背景技术

盐藻又称杜氏盐藻(Dunalselal.salana)，是绿藻门的一种嗜盐的单细胞藻类。类胡萝卜素是一种重要的食用色素，广泛存在于植物、藻类和真菌中，目前已有研究发现其中的β-胡萝卜素具有很强的清除自由基的功能，且对于防治肿瘤、心脑血管疾病、阿尔茨海默症以及白内障等与年龄有关的退行性疾病具有一定的作用，因而成为一种炙手可热的保健品，目前也常应用于保护视力、缓解眼部疲劳等。而工业合成的β-胡萝卜素多为反式结构，其效力和安全程度均不及天然β-胡萝卜素。由于盐藻具有在特定环境中大量产生类胡萝卜素特别是β胡萝卜素的能力，因此具备高度的商业价值，也成为热门的养殖对象。

目前已有研究表明，杜氏盐藻生长繁殖的最适条件与积累类胡萝卜素的最适条件并不相同、甚至存在较大差别；现有的盐藻养殖方法大多是为了平衡这两方面，并且多是侧重于生长，因此并不能为杜氏盐藻提供最佳的培养环境，从而大大影响了类胡萝卜素的产量(目前盐藻类胡萝卜素产量普遍在8～10％)。因此，迫切需要一种既能保证杜氏盐藻正常生长繁殖、又能促进类胡萝卜素大量积累的培养方法。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种杜氏盐藻的优化培育方法。

本发明具体技术方案如下：

本发明提供了一种杜氏盐藻的优化培育方法，包括如下步骤：

S1：配置一期培养基，盐度为13～18％；

S2：向所述一期培养基中接种藻种进行一期培养，光照周期为5000～8000lx光强照射t1、停止光照t2，其中t1:t2＝3～5:1；温度周期为25～35℃14～18h、15～25℃6～10h；重复上述光照周期和温度周期，定期调节pH值、使pH保持在7～8，连续培养10～14天；

S3：配置二期培养基，盐度为26～32％；

S4：所述一期培养结束后，将藻种接种到所述二期培养基中进行二期培养，光照周期为10000～15000lx光强照射t3、停止光照t4，其中t3:t4＞2(t1:t2)；温度周期为25～30℃6～10h、5～10℃14～18h；重复上述光照周期和温度周期，定期调节pH值、使pH保持在7～8，连续培养5～7天。

上述方法中，一期培养首先对盐藻进行扩大培养、使盐藻细胞正常生长繁殖、积累结构物质；经过一起培养、积累了足够数量和活力的盐藻细胞后，再通过二期培养提供相对逆境的环境、以促进类胡萝卜素的大量积累。

进一步地，步骤S2中，光照周期为5000～8000lx光强照射18～21h、停止光照3～6h。

通过在长时间光照之间间隔设置短时间的无光照时期，使光周期在18:6～21:3之间，一方面通过长时间的光照促进盐藻细胞的生长代谢，另一方面也通过适度的黑暗促进盐藻细胞分裂增殖。

进一步地，步骤S2中，光照周期为7000lx光强照射20h、停止光照4h；温度周期为28℃16h、18℃8h。

上述光周期(20:4)和温度周期为一期培养阶段的最佳光周期和温度周期，可以为盐藻细胞提供最佳生长增值条件。