[发明专利]杨树抗叶锈病的分子标记及其应用有效
| 申请号： | 201910751506.9 | 申请日： | 2019-08-15 |
| 公开（公告）号： | CN110468226B | 公开（公告）日： | 2020-07-31 |
| 发明（设计）人： | 汪念;塔西白克·努苏来提;夏文秀;肖正昂 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 42231 | 代理人： | 江慧 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 杨树 叶锈病 分子 标记 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种杨树抗叶锈病的分子标记，其特征在于，其由核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQID NO.2所示的引物经PCR扩增杨树基因组DNA得到。
2.权利要求1所述分子标记在选育杨树叶锈病抗性育种中的应用。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，用如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物对待检测的杨树叶片基因组DNA进行PCR扩增，获得的扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测，判断原则如下：
若电泳条带只出现800bp特异性条带，且没有出现300bp特异性条带，则待测样品为低抗叶锈病nn基因型；
若电泳条带出现800bp特异性条带的同时，还出现300bp特异性条带，则待测样品为高抗叶锈病np基因型。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系，10×扩增缓冲液5μL，4种dNTP混合物各200μmoL/L；引物对各10pmoL；模板DNA50ng；Taq DNA聚合酶2.5μL；加双蒸水至50μL。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述PCR扩增程序为：95℃预变性5min，95℃30s，55℃退火30s，72℃延伸45s，35个循环，72℃延伸5min。
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