[发明专利]一种提高嗜热厌氧杆菌发酵性能的方法

权利要求书

1.一种提高嗜热厌氧杆菌发酵性能的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将嗜热厌氧杆菌（Thermoanaerobacterium aotearoense）在种子培养基中活化，制备成种子液；

(2)以葡萄糖和/或木糖为碳源，以甲硫氨酸为添加剂替代酵母膏和胰蛋白胨，配制发酵培养基，并经过除菌；

(3) 将步骤 (1)种子液接种于步骤 (2)制得的发酵培养基中，进行厌氧发酵即可；

所述嗜热厌氧杆菌为Thermoanaerobacterium aotearoense SCUT27或其代谢途径改造的工程菌。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述嗜热厌氧杆菌代谢途径改造的工程菌为T.aotearoenseSCUT27△ldh或在其基础上敲除甲硫氨酸转运相关基因前端调节序列S-box构建的工程菌；所述敲除甲硫氨酸转运相关基因前端调节序列S-box为甲硫氨酸转运基因metNPQ前端核糖开关基因，所得工程菌为T.aotearoenseSCUT27△ldh/△S。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述甲硫氨酸浓度为10-30 mg/L。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述甲硫氨酸为L-甲硫氨酸、D-甲硫氨酸或DL-甲硫氨酸。

5.根据权利要求1~4任意一项所述的方法，其特征在于，步骤（1）所述种子培养基为MTC液体培养基，步骤（3）发酵培养基为改良MTC液体培养基。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述MTC液体培养基包括如下成分，A液：碳源5-100；B液：柠檬酸三钾盐0.1-6.25，一水柠檬酸0.1-3，硫酸钠0.1-5，磷酸二氢钾0.1-5，碳酸氢钠0.1-12.5；C液：尿素0.1-25，氯化铵0.1-7.5；D液：六水氯化镁0.1-5，四水氯化亚铁0.1-0.5，二水氯化钙0.1-1，一水半胱氨酸盐酸0.1-5；E液：二盐酸吡哆胺0.001-0.1，对氨基苯甲酸0.001-0.02，D-生物素0.001-0.01，维生素B12为0.001-0.01，维生素B1为0.001-0.02；单位g/L；所述改良MTC液体培养基为在上述MTC液体培养基中添加甲硫氨酸。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述除菌是指A、B、C和D液在115-121^oC条件下灭菌15-30 min，E液用0.22μM微孔滤膜过滤除菌。

8.根据权利要求1~4任意一项所述的方法，其特征在于，种子液的接种量为5-15%（v/v）；厌氧发酵的条件为：温度为40-70^oC，培养12~28 h，pH为3.5-8，转速为100-300 rpm。