[发明专利]一种肺癌检测联合标志物、检测试剂盒及其用途

说明书

本发明涉及一种肺癌检测联合标志物方法及其用途，属于分子医学技术领域。肺癌检测联合标志物，包括如下所示的基因组合：RB1、NKX2‑1、CDK4、TP53、MYC。本发明具有以下优势：本发明能够将EGFR敏感突变阳性的可手术非小细胞肺癌术后辅助化疗或辅助靶向获益情况加以区分，使用严谨的统计学方法筛选出单个预测因子之后，采用多个基因标记物联用的评分模型来提高预测的敏感性与特异性，应用该评分可以用于指导早中期肺癌术后辅助治疗方案的选择。

技术领域

本发明涉及一种肺癌检测联合标志物方法及其用途，属于分子医学技术领域。

背景技术

肺癌是全球范围内死亡率最高的癌症，其中20-25％的非小细胞肺癌患者确诊时适合进行手术根治治疗。对于这部分患者而言，术后复发是临床治疗失败的主要原因，临床上通常推荐术后使用一系列辅助治疗计划，包括辅助化疗、辅助靶向药物治疗等等治疗方案来降低复发率和死亡率。使用含铂药物辅助化疗仍然是非小细胞肺癌术后一种广泛使用的辅助方案，尽管如此，辅助化疗实际给患者带来的生存获益不甚理想，5年生存率只有14-30％，且化疗所造成的生活质量的下降也提示对其他治疗方案的需求。

近年来靶向药物的发展迅速，其中最具有代表性的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)类药物，如吉非替尼、奥西替尼等等，已在晚期EGFR阳性非小细胞肺癌中的临床疗效以及不良反应等方面都表现出显著的获益优势。同时，近期的ADJUVANT研究^[1]证实了对于II～IIIA期(N1-N2)EGFR敏感突变型非小细胞肺癌，吉非替尼对比长春瑞滨联合顺铂辅助治疗，患者无病生存期(DFS)得到显著延长且不良事件发生率也较低，给早中期患者术后辅助治疗带来了新的方案。尽管如此，即便术后使用了EGFR-TKI辅助治疗，仍有一部分患者较快复发；相对应的，另一部分患者即使使用辅助化疗，也获得了不逊色于靶向药物的生存获益。因此，如何找到更适合使用辅助靶向用药人群，为患者更精准地提供辅助用药方案亟待探索。不同于传统方法对于基因突变检测的局限，高通量测序技术(next-generationsequencing,NGS)可以允许更高分辨率以及更全面分子图谱方面的研究，能够实现更有效、特异性更高的生物标记物筛查与探索，是开展个体化精准医疗的理想方法。肿瘤的个体化治疗通常与患者所携带的预后和/或预测相关的肿瘤特有突变或临床因素有关。预后因子与肿瘤的基本特性相关，对患者复发率以及获益的影响与治疗方案的选择无关；而预测因子不同于预后因子，它决定着患者选择某一种治疗方案后获益的可能性。因此，找到这些预测因子对于治疗方案的选择尤为重要。

非专利文献：

[1]Zhong,et al.Gefitinib versus vinorelbine plus cisplatin asadjuvant treatment for stage II-IIIA(N1-N2)EGFR-mutant NSCLC(ADJUVANT/CTONG1104):a randomised,open-label,phase 3study.Lancet Oncol.2018；19(1):139-148.

发明内容

本发明的目的是提供一种用于指导肺癌术后辅助治疗方案选择的联合基因标志物评分以及其研究方法的建立。本发明基于ADJUVANT研究中的171个非小细胞肺癌手术组织样本，从中提取肿瘤细胞中的遗传物质，通过NGS技术，获得患者的基因突变图谱，通过筛选出的预测因子建立联合基因标志物评分，MEDUSA,将EGFR阳性患者中适合进行辅助靶向治疗与适合进行辅助化疗的患者进行进一步区分。

本发明对其中可以作为辅助治疗方案选择的关键基因标志物进行筛选及综合评分，通过MEDUSA评分的不同结果，指导临床非小细胞肺癌术后辅助治疗方案的选择。

本发明的第一个方面，提供了：