[发明专利]一种双酶法酶解大豆蛋白制备大豆多肽的方法

说明书

本发明公开了一种双酶法酶解大豆蛋白制备大豆多肽的方法，包括如下步骤：(1)先以大豆分离蛋白为原料，按1：6(w/v)‑1：10(w/v)的料液比加入相应纯化水，搅拌均匀，制成大豆蛋白匀浆；(2)调整pH，水浴加热到50‑60℃后，按蛋白重量4％‑6％的比例加入碱性蛋白酶，酶解后调pH，降温，按比例加入酸性蛋白酶，酶解；(3)酶解结束后，调pH，加热至90‑100℃并维持，灭酶活；酶解液冷却至50‑60℃，加1％‑2％的活性炭匀速搅拌，离心，过滤，浓缩后进行喷雾干燥，制得大豆多肽。本发明的大豆多肽苦涩味低，大豆多肽得率高，酶解效率高，得到大豆肽苦涩味低，其中300‑1000Da的肽段占比最高。

技术领域

本发明涉及酶解大豆蛋白的方法。具体涉及一种双酶法酶解大豆蛋白制备大豆多肽的方法。

背景技术

大豆多肽属于生物活性肽，是以大豆蛋白为主要原料，经过提取分离、纯化并精制而成的多肽混合物，一般以由3～6个氨基酸组成的小分子肽为主，还含有少量游离氨基酸、糖类、水分和无机盐等。其氨基酸组成与大豆蛋白完全一样，必须氨基酸的组成平衡良好且含量丰富；大豆多肽的溶解度高且对温度及pH的变化不敏感，溶液流动性好，是一种良好的大豆深加工产品。

目前工业上一般采用酶解法制备大豆多肽。但是目前的酶解法所得到的酶解产物由于疏水基团暴露会带来较强的苦涩味，且酶解过程中会产生较多的游离氨基酸，使得到的产物中肽含量变低，影响大豆多肽的品质。因此实际生产中，需要开发一种大豆多肽得率高，且产物品质好的酶解技术。

现有酶解法的酶解效率低，产物苦涩味及豆腥味重的问题，缺乏一种产物得率高、品质好的双酶法酶解大豆蛋白制备低分子量大豆多肽的方法。

发明内容

本发明解决了一种产物得率高、品质好的双酶法酶解大豆蛋白制备低分子量大豆多肽的方法。

为实现上述技术目的，本发明采用的技术方案如下：本发明的一种双酶法酶解大豆蛋白制备大豆多肽的方法，包括如下步骤：(1)先以大豆分离蛋白为原料，按1：6(w/v)-1：10(w/v)的料液比加入相应纯化水，搅拌均匀，制成大豆蛋白匀浆；

(2)调整pH为8.0-9.0，水浴加热到50-60℃后，按蛋白重量4％-6％的比例加入碱性蛋白酶，酶解2.0h-4.0h后调pH为0.5-2.0，降温至36-38℃，按3％-7％比例加入酸性蛋白酶，酶解2.0-4.0h；

(3)酶解结束后，调pH为4.0-5.0，加热至90-100℃并维持10-20min，灭酶活；酶解液冷却至50-60℃，加1％-2％的30-100目活性炭匀速搅拌，搅拌时间为20-30min，离心，过滤，浓缩至波美度10-20°后进行喷雾干燥，制得大豆多肽。

进一步地，在步骤(1)中，所述的大豆分离蛋白为市售的大豆分离蛋白产品或从脱脂豆粕中分离出的大豆分离蛋白。

进一步地，在步骤(1)中，所述的水为自来水、去离子水或超纯水中的任意一种；在步骤(2)中，所述的碱性调节剂为NaOH溶液、KOH溶液、NaHCO₃溶液、KHCO₃溶液。

更进一步地，在步骤(1)中，所述的水为超纯水，在步骤(2)中，所述的碱性调节剂为NaOH溶液。

进一步地，在步骤(2)中，所述的酸性调节剂为HCl溶液、H₂SO₄溶液以及相对应的食品领域中常用的酸性盐。

进一步地，在步骤(2)中，所述的酸性调节剂为HCl溶液，所述的碱性蛋白酶为Alacase。

更进一步地，在步骤(2)中，所述的酸性蛋白酶为胃蛋白酶。

进一步地，在步骤(2)中，所述的酶解的容器为水浴锅、恒温箱、烘箱或恒温加热器。