[发明专利]酿酒酵母及其用途

说明书

本发明提出了一种酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，于2018年1月29日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2018062，分类命名为：Saccharomyces cerevisiae HEC‑YLK，保藏地址为：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内，中国典型培养物保藏中心。该菌株是发明人首次从传统酒曲中分离和诱变获得的，该菌株具有高产角鲨烯的特点。

技术领域

本发明涉及生物领域，具体地，本发明涉及酿酒酵母、用途及生产角鲨烯的方法。

背景技术

角鲨烯(Squalene)是一种开链三萜类化合物。其化学名为：全反-2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-廿四碳六烯。角鲨烯在工业、医药、化妆品领域有着广泛的用途。在工业上，角鲨烯可用于食品机械设备中润滑剂、杀虫剂、衣物护理剂等；在医药行业可用作药物载体、疫苗佐剂，也可用于提高人体的缺氧耐受能力；在化妆品领域，主要用作皮肤保湿剂、抗氧化剂。

角鲨烯的天然来源主要包括鱼油，植物油，微生物。其中在鱼油中，尤其是鲨鱼肝油中含量较高，这也是目前市场上提取角鲨烯的主要来源。但是随着海洋资源的大肆捕捞，导致了生态环境的破坏，从鲨鱼中大量提取角鲨烯的方法是不可持续的；而一些制药公司在采用角鲨烯做疫苗佐剂时需要避免动物源病原体的对产品的干扰，也不主张采用鲨鱼提取的角鲨烯。一些植物油中也含有角鲨烯，如橄榄油、大豆油、山茶油和米糠油。如橄榄油含有角鲨烯150～700mg/100g，米糠油含量为332mg/100g，目前国际上一些知名品牌的化妆品中所采用的角鲨烯原料就为橄榄油中提取。由于植物油中角鲨烯含量低，其使用成本较高。微生物也是角鲨烯的一个来源，如从微藻中提取《CN102787074B，罗盖特兄弟公司，生产角鲨烯的微藻新菌株》，另外，酵母也是被研究用于产角鲨烯的来源。酵母菌具有个体微小，结构简单，生长繁殖速度快，容易进行大规模发酵放大等特点。如赛诺菲申请了从发酵酵母中提取角鲨烯的方法《CN105431542A，从发酵的酵母的细胞悬浮液中生产角鲨烯和/或甾醇》；诺华《CN102257149B由超产酵母生产角鲨烯》中采用酿酒酵母生产的角鲨烯开发了一种制备水包油乳液佐剂的方法，用于疫苗中佐剂使用；中国科学院青岛生物能源与过程研究所，申请了《一种高产角鲨烯的类酵母菌及其应用，CN104560731A》的专利，从海洋中分离到了一株类酵母菌用于发酵生产角鲨烯。

酿酒酵母作为一种生物安全性良好的菌株，用于角鲨烯的生产具有很好的优势，然而，目前的酿酒酵母发酵产角鲨烯的含量都较低，生产成本较高。例如Bhattacharjee(P,B.,et al.,Studies on fermentative production of squalene.World Journal ofMicrobiologyBiotechnology,2001.17(8):p.811-816.)等以酿酒酵母和糖蜜中分离到的德氏孢圆酵母厌氧发酵生产角鲨烯，结果表明，酿酒酵母和德氏孢圆酵母中角鲨烯的产量分别为41.2μg/g和237.2μg/g干细胞。Mantzouridou等人通过对酿酒酵母BY4741和EGY48进行发酵条件的优化，结果角鲨烯最高产量也仅有1241μg/g和1155μg/g干细胞(Mantzouridou,F.,E.Naziri,and M.Z.Tsimidou,Squalene versus ergosterolformation using Saccharomyces cerevisiae:combined effect of oxygen supply,inoculum size,and fermentation time on yield and selectivity of thebioprocess.J Agric Food Chem,2009.57(14):p.6189-98.)。

因此，筛选角鲨烯生产能力强的酿酒酵母对于工业化生产微生物来源的角鲨烯具有重要意义。

发明内容

本申请是发明人基于对如下问题和事实的发现而提出的：