[发明专利]一种短命植物新疆小拟南芥组织培养方法

权利要求书

1.一种新疆小拟南芥组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）新疆小拟南芥种子的消毒，

2）消毒后的种子在含MS的培养皿上点播、培养；

3）在步骤2）培养得到的小拟南芥幼苗上选取外植体；

4）将外植体在不定芽培养基进行愈伤诱导培养，得到愈伤组织；进一步进行不定芽诱导培养得到不定芽；

5）将不定芽在生根培养基进行生根诱导培养，得到完整植株；

所述不定芽培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA；所述生根培养基为MS+0.1mg/L NAA；每升所述MS培养基包括：30 g的蔗糖、0.5 g 的2-吗啉乙磺酸和4.4 g的基础培养基，所述MS培养基的pH值为5.8。

2.根据权利要求1所述的新疆小拟南芥组织培养方法，其特征在于，所述步骤1）包括：将新疆小拟南芥种子用70%的乙醇洗涤种子1 min，再用20%次氯酸钠溶液震荡洗涤8-10min，最后用无菌水清洗6-7次，每次充分振荡混匀。

3.根据权利要求1或2所述的新疆小拟南芥组织培养方法，其特征在于，所述外植体为根或下胚轴。

4.根据权利要求3所述的新疆小拟南芥组织培养方法，其特征在于，所述步骤2）中，种子的培养步骤为在4℃条件下春化处理3 d，在16 h光照/8 h黑暗，温度为22℃条件下培养7-8天，得到一周苗龄的小拟南芥幼苗。

5.根据权利要求1或2所述的新疆小拟南芥组织培养方法，其特征在于，所述外植体为宽大肥厚的鲜绿叶片或粗壮叶柄。

6.根据权利要求5所述的新疆小拟南芥组织培养方法，其特征在于，所述步骤2）中，种子的培养步骤为在4℃条件下春化处理3 d，在16 h光照/8 h黑暗，温度为22℃条件下竖直培养7-8天得到小拟南芥幼苗，将小拟南芥幼苗移栽于含MS培养基中，封口保证无菌，在16h光照/8 h黑暗，温度为22℃条件下培养4周，得到五周苗龄的小拟南芥幼苗。

7.根据权利要求1所述的新疆小拟南芥组织培养方法，其特征在于，所述步骤4）中愈伤诱导培养的条件为：16 h光照/8 h黑暗，温度为22℃，不定芽诱导培养的条件为：16 h光照/8 h黑暗，温度为22℃。

8.根据权利要求1所述的新疆小拟南芥组织培养方法，其特征在于，所述步骤5）中生根诱导培养的条件为：16 h光照/8 h黑暗，温度为22℃。

9.根据权利要求1所述的新疆小拟南芥组织培养方法，其特征在于，在步骤5）之后，对完整植株进行炼苗，并移栽得到成苗，所述炼苗条件为：16 h光照/8 h黑暗，温度为22℃。