[发明专利]一种红曲橙色素的分离纯化方法

权利要求书

1.一种红曲橙色素的分离纯化方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

步骤1、色素粗提液的制备：将红曲菌经液态发酵后，经过滤收集菌丝体并清洗，用pH＝2的70％的乙醇超声提取，离心后得到色素粗提液；

步骤2、色素分离：大孔吸附树脂CAD-40经预处理后，采用湿法装填层析柱，色素粗提液上样后用无水乙醇以1BV/h的速率洗脱；

步骤3、红曲橙色素的收集：洗脱液流出2.2BV后开始收集，得到的收集液即为红曲橙色素。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1中按1％的接种量将红曲菌孢子液以10⁵个/mL的接种量接种于马铃薯葡萄糖液体培养基PDB中，于28℃，200rpm恒温震荡条件培养30～50h；然后向发酵液中等体积加入灭过菌的0.2mol/L，pH6柠檬酸-磷酸钠缓冲液，28℃，200rpm继续培养5d；发酵完毕后，发酵液经滤布抽真空过滤，收集菌丝体。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1中所述清洗采用1～5倍发酵液体积的pH2的酸水冲洗。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1中所述超声功率为80w～120w，超声时间为0.5～2.5h，超声温度为10℃～60℃；所述离心转速为6000rpm～10000rpm，离心时间为5min～20min。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2中大孔吸附树脂的预处理步骤具体为：取大孔吸附树脂，依次用乙醇、蒸馏水、5％HCl、蒸馏水、5％NaOH、蒸馏水进行预处理。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2中用4～6BV的无水乙醇以1BV/h的速率洗脱。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2中上样速率为1～5BV/h，在出现泄漏点时终止上样。