[发明专利]用于检测缺失型α-地中海贫血的引物组合和试剂盒

权利要求书

1.用于检测缺失型α-地中海贫血的引物组合，包括以下引物：

α2-3.7-F：5’-TTCCTTCCTCACCCCACATCCC-3’；

20.5-F：5’-GCCCAACATCCGGAGTACATG-3’；

3.7-20.5-R1：5’-CTCAAAGCACTCTAGGGTCCAGCG-3’；

3.7-20.5-R2：5’-AAAGCACTCTAGGGTCCAGCG-3’；

3.7-20.5-R3：5’-CTCAAAGCACTCTAGGGTCCA-3’。

2.根据权利要求1所述的引物组合，其特征在于，所述引物组合还包括以下引物组任一一组或多组：

-α 4.2 引物组：

4.2-F：5’-TCCCGGTTTACCCATGTGGTGCCTC-3’；

4.2-R：5’-CCCGTTGGATCTTCTCATTTCCC-3’；

-- SEA 引物组：

SEA-F：5’-CGATCTGGGCTCTGTGTTCTCAGT-3’；

SEA-R：5’-AGCCCACGTTGTGTTCATGGC-3’；

-- THAI 引物组：

THAI-F：5’-GACCATTCCTCAGCGTGGGTG-3’；

THAI-R：5’-CAAGTGGGCTGAGCCCTTGAG-3’；

-- MED 引物组：

MED-F：5’-TACCCTTTGCAAGCACACGTAC-3’；

MED-R：5’-TCAATCTCCGACAGCTCCGAC-3’；

-- FIL 引物组：

FIL-F：5’-TTTAAATGGGCAAAACAGGCCAGG-3’；

FIL-R：5’-ATAACCTTTATCTGCCACATGTAGC-3’。

3.根据权利要求2所述的引物组合，其特征在于所述引物组合还包括用于评估DNA模板质量的引物组，其上游引物与α2-3.7-F的序列相同，其下游引物的序列为α2-R：5’-TTATTCAAAGACCAGGAAGGGCC-3’。

4.一种检测缺失型α-地中海贫血的试剂盒，包括PCR反应液、标准分子量marker和上样缓冲液，其特征在于，所述PCR反应液包括权利要求1-3任一项所述的引物组合、dNTP、DNA聚合酶、BSA、DMSO、缓冲液和去离子水。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述缓冲液为2×Multiplex PCRBuffer。

6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述引物组合中，各引物的浓度为0.06-0.10μmol/L。

7.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，当引物组合为权利要求2或3所述引物组合时，所述引物组合中，所述引物α2-3.7-F的浓度为0.08μmol/L，所述引物20.5-F的浓度为0.08μmol/L，所述引物3.7-20.5-R1的浓度为0.06μmol/L，所述引物3.7-20.5-R2的浓度为0.06μmol/L，所述引物3.7-20.5-R3的浓度为0.06μmol/L，所述引物4.2-F的浓度为0.08μmol/L，所述引物4.2-R的浓度为0.08μmol/L，所述引物SEA-F的浓度为0.08μmol/L，所述引物SEA-R的浓度为0.08μmol/L，所述引物THAI-F的浓度为0.08μmol/L，所述引物THAI-R的浓度为0.08μmol/L，所述引物MED-F的浓度为0.08μmol/L，所述引物MED-R的浓度为0.08μmol/L，所述引物FIL-F的浓度为0.08μmol/L，所述引物FIL-R的浓度为0.08μmol/L。